[发明专利]一种具有抗凝血土元多肽及其酶解制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种具有抗凝血土元多肽及其酶解制备方法与应用，制备方法包括土元干体清洗干燥，粉粹成粉末；加入水均匀搅拌，匀速搅拌0.5h~4h，离心，得到蛋白沉淀，干燥；将蛋白加水溶解，比例为4~25g100mL，pH调至7.0~11，加入碱性蛋白酶，该酶与蛋白重量之比0.1~5mL100g，温度30~70℃，搅拌；将酶解液通过大孔吸附树脂交换柱，分离纯化，收集干燥，得土元抗凝血肽粉。本发明为抗凝血类活性物质增加了新来源，实现了原料的充分利用，且产品活性高、制备过程方便可行、环保等优点，用途广泛，可作为预防血栓、溶血栓、降血稠类食品的原料，辅以乳糖、甘露醇等，制成粉剂、片剂、胶囊或口服液。

主权项

一种具有抗凝血土元多肽的酶解制备方法，其特征在于，包括如下步骤：取500g土元干粉，干粉与水的比例为15g：100 mL，pH调至9.0，以300r/min的速度均匀搅拌2h，取上清液，再将pH调至4.6，最后得到蛋白沉淀，将其pH调至7.0，干燥，制得土元蛋白；将土元蛋白加入水中溶解，蛋白与水的比例为10 g：100 mL，控制pH值在8.5，再加入Alcalase 2.4L碱性蛋白酶，酶体积与土元蛋白重量之比为2.0 mL：100 g，反应温度为60℃，搅拌速度为200 r/min，反应时间 2.5h；煮沸10min，将酶解液过大孔吸附树脂DA 201‑C交换柱，从纯净水开始逐渐增大乙醇浓度，以0, 25, 50, 75, 100%不同浓度乙醇进行梯度洗脱，流速控制在1.0 mL/min，在波长214 nm处测定吸光度，以吸收峰来分别收集75%乙醇洗脱组分洗脱液，冷冻干燥得抗凝血的土元多肽。