[发明专利]一种利用实时荧光定量PCR进行谷子锈病早期诊断的技术

摘要

本发明涉及一种通过实时荧光定量PCR检测谷子叶片中锈菌（Uromycessetariae-italicae）含量的方法，是在谷子接种锈菌0h，6h，18h，30h，36h，42h，72h后采集谷子叶片样本；将各时间点采集的叶片样本提取总DNA，根据锈菌核糖体ITS序列设计特异性引物，通过实时荧光定量PCR，利用特异性引物，对锈菌进行定量分析，测定锈菌在谷子叶片接种后组织内的DNA随时间的变化规律。本发明建立了精确度高、特异性强、灵敏度高的谷子锈菌荧光定量PCR检测方法，进而为锈菌的致病机制、分子生物学研究等奠定了基础。 

主权项

一种通过实时荧光定量PCR对谷子叶片中的锈菌进行早期诊断的方法，其特征在于：利用real‑time fluorescence quantitative PCR反应的特异性引物，分别命名为rustf和rustr——rustf：GGTGCACTTAATTGTGGCTCAA，rustr：CTCCTTTTCTTTTTCCCTCTCAAA；通过DNA 结合染料（SYBR Green I）法，以提取的谷子叶片总DNA为模板进行扩增反应，若能够扩增出145bp的核苷酸片段，则该谷子已经感染了谷子锈病。