[发明专利]一种硫碱弧菌的遗传转化方法有效
| 申请号： | 201410209110.9 | 申请日： | 2014-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN105087625B | 公开（公告）日： | 2019-03-15 |
| 发明（设计）人： | 邢建民;许晓卉;穆廷祯;宋子煜;吴丹 | 申请（专利权）人： | 中国科学院过程工程研究所 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N1/21;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 | 代理人： | 杨小蓉 |
| 地址： | 100190 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及分子生物学领域，具体地，本发明涉及一种嗜盐嗜碱硫碱弧菌的遗传转化方法。本发明的硫碱弧菌的遗传转化方法，包括如下步骤：1)将分离纯化后的菌株接种在硫碱弧菌合成培养基中培养，培养时间为12～18h，OD600值在0.5～0.9之间时收集菌体；2)通过CaCl2‑NaCl溶液处理的方法，制备具有吸附外源DNA能力的感受态细胞；3)通过热激反应，将外源的带有抗性的质粒导入步骤2)的感受态细胞中；4)将导入质粒的感受态细胞进行孵育，涂布在抗性平板上，筛选具有抗性的转化菌株。本发明为硫碱弧菌的分子生物学和基因工程改造等研究提供了有利的工具。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 嗜盐嗜碱硫碱 弧菌 遗传 转化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种硫碱弧菌的遗传转化方法，包括如下步骤：1)将分离纯化后的菌株接种在硫碱弧菌合成培养基中培养，培养时间为12～18h，OD600值在0.5～0.9之间时收集菌体；其中，所述硫碱弧菌为Thioalkalivibrio versutus D301，其菌种保藏编号为CGMCC No.8497；2)通过CaCl2‑NaCl溶液处理的方法，制备具有吸附外源DNA能力的感受态细胞；3)通过热激反应，将外源的带有抗性的质粒导入步骤2)的感受态细胞中。
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