[发明专利]快速定量检测玉米赤霉烯酮的方法

摘要

本发明公开一种快速定量检测玉米赤霉烯酮的方法。该方法的步骤如下：制备胶体金，将拉曼信号分子4,4'-联吡啶和ZEN单克隆抗体结合到胶体金表面，做成金纳米探针；经过硅烷化和醛基化将玻片活化，使其表面充满-CHO，将ZEN-BSA结合到活化了的玻片表面；制备一系列浓度梯度的样品液；将金纳米探针和样品液同时滴到含ZEN-BSA的玻片上；获得拉曼光谱图，绘制校正曲线；根据绘制的校正曲线，求待测样品中ZEN的含量。本发明所述的方法具有操作简单、灵敏度高、检测区间宽和特意性强的突出优点，人员不需要经过专业的培训就可以在最短的时间内实现检测，在食品安全、兴奋剂检测以及环境监控等领域具有广泛的应用前景。

主权项

一种快速定量检测玉米赤霉烯酮的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将拉曼信号分子和ZEN单克隆抗体结合到胶体金表面，用BSA封闭剩余活性位点，做成金纳米探针；(2)将玻片进行清洗，再用水虎鱼溶液浸泡，然后依次用硅烷和醛处理，使其硅烷化和醛基化，使表面充满醛基，和抗原ZEN‑BSA偶联，最后用BSA进行封闭，得到固定抗原偶联物的基底；其中，玻片每经过一个处理都要用超纯水清洗和氮气吹干；(3)往空白饲料中添加ZEN标准溶液，混匀，用无水甲醇提取ZEN，经过分离和纯化，最终用PBS缓冲液溶解ZEN，制成一系列浓度梯度的样品液；(4)将步骤(1)的金纳米探针分别和步骤(3)制成的一系列浓度梯度的样品液同时滴到步骤(2)得到的固定抗原偶联物的基底上，则样品液中的ZEN和基底表面的ZEN‑BSA竞争性的和胶体金表面的ZEN单克隆抗体结合；(5)根据ZEN浓度和拉曼信号强度的对应关系，绘制校正曲线；(6)取待测样品，用无水甲醇提取ZEN，经过分离和纯化，并用PBS缓冲液稀释，根据该待测样品获得的拉曼信号强度，通过步骤(5)的校正曲线快速得到该待测样品中的ZEN浓度。