[发明专利]基于Biolog微平板及微量热法判断可提高土壤微生物活性碳源因子的方法

摘要

基于Biolog微平板及微量热法判断可提高土壤微生物活性碳源因子的方法，步骤为采集不同施肥处理（不施肥、施用无机肥、施用有机肥）的土壤样品；进行Biolog Eco微平板实验，对Biolog的平均吸光值（AWCD）进行主成分分析，区分引起分异的碳源因子；进行微量热实验，区分不同施肥处理对土壤微生物热代谢活性的影响；将引起分异的碳源分别加入不施肥的对照组土壤中，研究不同碳源对土壤微生物热代谢活性的影响,从而判断可提高土壤微生物活性碳源因子的方法。

主权项

基于Biolog微平板及微量热法判断可提高土壤微生物活性碳源因子的方法，其特征在于步骤为：（1）采集不施肥、施用无机肥、施用有机肥的土壤样品；（2）进行Biolog Eco微平板实验，对Biolog的平均吸光值进行主成分分析，区分引起分异的碳源因子；所述的Biolog Eco实验步骤为：将4℃保藏的土壤样品进行1000倍稀释，接种到Biolog Eco微平板上，然后放入28℃的培养箱恒温培养，每隔12 h读取对数生长期590 nm的吸光值，然后采用主成分分析对微平板中吸光值进行分析：即将吸光值通过降维的方式使其简化，主成分按其所含信息量多少排序，依次记做PC1、PC2，根据PC1、PC2的因子得分系数绘制二维图，若不同样品在横轴或纵轴上能显著区分开，说明不同施肥处理引起碳源利用能力的分异，选出与主成分相关性较高的碳源因子，其相关系数r >0.5或r <‑0.5；（3）进行微量热实验，区分不同施肥处理对土壤微生物热代谢活性的影响；将引起分异的碳源分别加入不施肥的对照组土壤中，研究不同碳源对土壤微生物热代谢活性的影响；所述微量热实验步骤为：将不同施肥处理的土壤样品置于灭菌的安瓿瓶中，添加0.2 ml含有5.0mg葡萄糖和5.0 mg硫酸铵溶液，刺激微生物生长；然后用聚四氟乙烯封口，置于微量热仪中28℃培养，记录培养过程中的热功率值，待信号终止即停止试验，得到热功率曲线，进而区分不同施肥处理对土壤微生物热代谢活性；然后根据Biolog Eco实验结果，将主成分分析中相关系数r >0.5或r <‑0.5的碳源因子分别作为额外碳源加入不施肥土壤中，再次进行微量热实验，得到热功率曲线，若该曲线的峰型或热动力参数与施肥处理土壤接近或吻合，说明该碳源是提高土壤微生物活性碳源因子之一。