[发明专利]从去白细胞滤器里分离淋巴细胞的方法无效
| 申请号： | 201410232725.3 | 申请日： | 2014-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN103981145A | 公开（公告）日： | 2014-08-13 |
| 发明（设计）人： | 蒋宇扬;陈妍 | 申请（专利权）人： | 深圳市坤健创新药物研究院;清华大学深圳研究生院 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 深圳市中知专利商标代理有限公司 44101 | 代理人： | 孙皓;陈贞 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供了一种从去白细胞滤器里分离淋巴细胞的方法，包括以下步骤：获取PBS、白细胞和部分血液的混合液；弃去血浆，向弃去血浆的细胞混合液中加入磷酸缓冲液，小心混匀形成混合液；将混合液小心叠加于细胞分离液上离心，收集第二层细胞放入磷酸缓冲液中，充分混匀后，离心，弃去上清留沉淀,然后重复洗涤,最后沉淀得到所分离的外周血单个核细胞；将所分离的外周血单个核细胞培养于37℃，5％CO2培养箱，过夜培养后，收集悬浮的淋巴细胞。本发明提供的从去白细胞滤器中分离淋巴细胞的方法，不仅可以避免淋巴细胞的浪费，而且对红细胞，血小板等其它成分不会造成影响，用此分离方法得到的淋巴细胞数量可达1×106，存活率大于90％。 | ||
| 搜索关键词： | 白细胞 滤器 分离 淋巴细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种从去白细胞滤器里分离淋巴细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：取去白细胞滤器，过滤全血后，白细胞残留在滤器中；步骤二：使用磷酸缓冲液冲洗去白细胞滤器，获得磷酸缓冲液、白细胞和部分血液的混合液；步骤三：将磷酸缓冲液、白细胞和部分血液的混合液离心弃去血浆；步骤四：向弃去血浆的细胞混合液中加入磷酸缓冲液，小心混匀形成混合液；步骤五：将混合液小心叠加于细胞分离液上离心，此时离心管中由上向下分为四层：第一层为血浆层；第二层为环状乳白色单个核细胞层；第三层为透明分离液层；第四层为红细胞层；收集第二层细胞放入含磷酸缓冲液的试管中，充分混匀后，离心，弃去上清留沉淀,然后重复洗涤,最后沉淀得到所分离的外周血单个核细胞；步骤六：将所分离的外周血单个核细胞培养于37℃，5％CO2培养箱，过夜培养后，收集悬浮的淋巴细胞。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于深圳市坤健创新药物研究院;清华大学深圳研究生院，未经深圳市坤健创新药物研究院;清华大学深圳研究生院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201410232725.3/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种玻璃基板柔性掰边装置
- 下一篇：一种RFID防转移且不残胶的电子标签
