[发明专利]一种将外源基因导入粳稻品种8m30的水稻细胞的方法有效
申请号: | 201410235525.3 | 申请日: | 2014-05-28 |
公开(公告)号: | CN103981214A | 公开(公告)日: | 2014-08-13 |
发明(设计)人: | 李浩;杨剑波;魏鹏程;杨亚春;倪大虎;李莉;倪金龙;陆徐忠;宋丰顺;马卉;秦瑞英 | 申请(专利权)人: | 安徽省农业科学院水稻研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00;A01H4/00 |
代理公司: | 北京律谱知识产权代理事务所(普通合伙) 11457 | 代理人: | 黄云铎 |
地址: | 230031 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明提供了一种将外源基因导入粳稻品种8m30的水稻细胞的方法。具体地讲,本发明是通过农杆菌介导,将外源基因导入到闭颖授粉的粳稻品种8m30中。在遗传转化过程中,本发明采用了特制的培养基以及比常规介导方法更好地转化方式。通过PCR检测鉴定,表明外源基因已导入8m30中。该方法成功实现了闭颖授粉的粳稻品种的遗传转化,在加快性状改良过程同时,可避免花粉外传导致的基因漂移。 | ||
搜索关键词: | 一种 将外源 基因 导入 粳稻 品种 m30 水稻 细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种将外源基因导入粳稻品种8m30的水稻细胞的方法,包括下述步骤:步骤1、将粳稻品种8m30的种子去壳、灭菌后将胚分离出来,置于愈伤组织诱导培养基上以产生次级愈伤组织;步骤2、将所述次级愈伤组织转移至新的愈伤组织诱导培养基进行预培养;步骤3、将步骤2中获得的愈伤组织与携带所述外源基因的农杆菌接触持续第一预定时间段;步骤4、将步骤3所获得的愈伤组织转移到垫有无菌滤纸的培养皿中,21‑23℃培养第二预定时间段,所述无菌滤纸中加入2.5‑3.5mL农杆菌悬浮培养基;步骤5、将步骤4处理后的愈伤组织置于前筛选培养基上培养5‑7天;步骤6、将步骤5处理后的愈伤组织转移到筛选培养基上,以获得抗性愈伤组织;步骤7、将所述抗性愈伤组织转移到分化再生培养基中分化成苗;和步骤8、将步骤7所获得的苗转移到生根培养基中生根。
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