[发明专利]一种禽类羽毛的透射电镜样品处理方法

摘要

本发明属于实验样品处理技术领域，具体为一种禽类羽毛的透射电镜样品处理方法。本发明步骤包括：漂洗液的配制、包埋剂的配制、漂洗、脱水和浸透、聚合。本发明借助水浴超声清洗及真空烘箱梯度浸透和固化，解决了禽类羽毛透射电镜样品处理过程中，样品不易润湿、包埋剂浸透困难的问题，使得最后得到的样品切片能够铺展平整，切片皱褶、卷曲、破损、剥离的现象大大减少，由此方便了对羽毛内部的超微结构的进一步观察和研究。

主权项

 一种禽类羽毛的透射电镜样品处理方法，包括漂洗、脱水、浸透和聚合，其特征在于具体步骤为：（1）漂洗液的配制：0.08‑0.12% Tween‑20，0.2‑0.28M NaOH，甲酸/乙醇按体积比为2:（2.8‑3.2）的混合液；（2）包埋剂的配制：SPI‑Pon812包埋剂的配制：将SPI‑Pon812、DDSA、NMA、DMP‑30，逐样加入烧杯中，搅拌混合后，置于磁力搅拌器搅动均匀；搅动20~60min后，用真空烘箱将包埋剂中的气泡抽出，将配制好的包埋剂转入干燥离心管中，4℃保存备用；（3）漂洗：将羽小枝放入盛有Tween‑20和NaOH混合液的青霉素瓶中，超声振荡；吸尽混合液，加入甲酸/乙醇混合液，手动振荡后静置2~3h；（4）脱水：用无水乙醇和丙酮对羽小枝样品进行脱水；（5）浸透：用丙酮与包埋剂的混合液对羽小枝样品进行梯度浸透，最后换成包埋板，用纯包埋剂浸透样品； （6）聚合：加热聚合，完成羽小枝样品的包埋。