[发明专利]一种从豆渣中制备高活性纤溶酶的方法在审
| 申请号： | 201410249251.3 | 申请日： | 2014-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN104004740A | 公开（公告）日： | 2014-08-27 |
| 发明（设计）人： | 吴非;赵城彬;孙楚;李秋;姚子鹏;周媛媛;刘瑶;董兴叶;盛慧;刘金阳 | 申请（专利权）人： | 东北农业大学 |
| 主分类号： | C12N9/68 | 分类号： | C12N9/68;C12R1/685;C12R1/69 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 150030 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 一种从豆渣中制备高活性纤溶酶的方法属于生物化学领域，该方法包括以下步骤：(1)将豆渣干燥后进行超微粉碎；(2)将超微粉碎后的豆渣进行水分调节，然后进行灭菌，冷却后接入黑曲霉与米曲霉进行固态发酵得发酵产物；(3)将发酵产物分散于生理盐水中进行超声辅助浸提，浸提后离心分离得上清液；(4)将上清液进行硫酸铵盐析，盐析后进行透析浓缩、阴离子交换层析和凝胶过滤层析，层析后进行真空浓缩、冷冻干燥即得纤溶酶；本方法操作简单、成本低、生产效率高，制备的纤溶酶为单一组分，表观分子量为30KDa，是一种典型的丝氨酸蛋白酶，且该纤溶酶活性强、纯度高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 豆渣 制备 活性 纤溶酶 方法 | ||
【主权项】：
一种从豆渣中制备高活性纤溶酶的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)将豆渣干燥后用QLM扁平式超音速气流粉碎系统进行超微粉碎，所述的进料气流为0.6MPa，粉碎气流为0.6MPa；(2)将超微粉碎后的豆渣进行水分调节，然后进行灭菌，冷却后接入黑曲霉与米曲霉进行固态发酵得发酵产物，所述的黑曲霉接种量为豆渣质量的6％，米曲霉接种量为豆渣质量的8％，发酵温度为32℃，发酵pH为7.5，发酵时间为10‑40h；(3)将发酵产物分散于生理盐水中进行超声辅助浸提，所述的超声功率为20‑100W，浸提温度为20‑40℃，浸提时间为1‑5h，浸提后离心分离得上清液；(4)将上清液进行硫酸铵盐析，所述的硫酸铵饱和度为30‑80％，盐析后进行透析浓缩、DEAE‑Sepharose FastFlow阴离子交换层析和Sephadex G‑75凝胶过滤层析，层析后进行真空浓缩、冷冻干燥即得纤溶酶。
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