[发明专利]一种诱变复合霉菌发酵制备纤溶酶的方法

摘要

一种诱变复合霉菌发酵制备纤溶酶的方法属于生物发酵技术领域，该方法包括以下步骤：(1)将黄豆与红豆混合后进行超微粉碎，超微粉碎后与水混合得混合液；(2)将黑曲霉与米曲霉复配混合形成复合霉菌，将复合霉菌活化后进行N⁺离子注入诱变，将N⁺离子注入后的复合霉菌进行磁场二次诱变，将二次诱变的复合霉菌接种于已灭菌的混合液中进行发酵，发酵后离心分离取上清液；(3)将上清液透析后进行超滤处理，超滤后进行真空浓缩、冷冻干燥即得纤溶酶；本方法采用离子注入诱变技术结合磁场诱变技术应用于复合霉菌的诱变育种，将诱变后的复合霉菌进行发酵制备纤溶酶，该方法生产周期短，制备的纤溶酶活性高，可应用于高溶栓活性发酵食品的研发。

主权项

一种诱变复合霉菌发酵制备纤溶酶的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)将黄豆与红豆混合形成混合豆，所述的黄豆与红豆的质量比为1∶1‑3，将混合豆用QLM扁平式超音速气流粉碎系统进行超微粉碎，所述的进料气流为0.6MPa，粉碎气流为0.6MP，超微粉碎后与水混合得到混合液；(2)将黑曲霉与米曲霉以1∶1的复配比例混合形成复合霉菌，将复合霉菌活化后进行N⁺离子注入诱变，所述的注入能量为5‑25keV，注入剂量为20×10¹⁴‑100×10¹⁴ions/cm²，将N⁺离子注入后的复合霉菌进行磁场二次诱变，所述的磁场强度为0.2‑1.0A/m，磁场作用时间为0.5‑2.5h，将二次诱变的复合霉菌接种于已灭菌的混合液中进行发酵，所述的接种量为混合液质量的8‑16％，发酵温度为28‑36℃，发酵时间为10‑30h，发酵后离心分离取上清液；(3)将上清液透析后进行超滤处理，超滤后进行真空浓缩、冷冻干燥即得纤溶酶。