[发明专利]一种利用柳枝稷幼穗进行无性繁殖的方法

摘要

本发明公开了一种利用柳枝稷幼穗进行无性繁殖的方法，在柳枝稷第4个节完全露出时，取柳枝稷幼穗作为诱导外植体；将外植体消毒后，在两端各切下0.5cm，并纵向将外植体切为两半，切面向下接种到诱导培养基上；30～40天后获得穗芽，对获得的穗芽进行继代培养，进一步扩大穗芽的数量；将继代后的穗芽从芽块分离成单个个体种植到培养基质中，约7天后即可生根，发育成为新的植株，此时可将幼苗连同培养基质栽植于温室或大田。本发明中的无性繁殖方法，以柳枝稷幼穗为外植体，通过诱导及继代培养，能够获得大量基因型完全一致的后代。

主权项

1.一种利用柳枝稷幼穗进行无性繁殖的方法，其特征在于，包括以下操作：1)待柳枝稷生长发育至第4个节完全露出、幼穗已形成时，从靠近地面处将柳枝稷分蘖剪下，从下向上剥去柳枝稷分蘖上的叶片至节间长度小于1cm时停止，距该节间上端茎节上下各1.2～1.5cm切下，获得包含幼穗的外植体；所述的外植体中包含有2cm长度的幼穗，具有正常花原基组织；2)将外植体消毒并用无菌水漂洗；3)无菌环境下，将外植体两端各切去0.2～0.5cm，将外植体纵向切为两半，切口向下接种到诱导培养基上；接种后置于恒温光照培养箱中，培养30～40天至穗芽形成；所述的诱导培养基是以MS为基础培养基，并添加6‑BA、琼脂粉和蔗糖；所述的诱导培养基的成分为：MS基础培养基4.43g/L，3mmol/L的6‑BA、7.5g/L的琼脂粉和30g/L的蔗糖；4)将形成的穗芽沿基部2～3mm处切除，并再次接种到诱导培养基上，待新生芽生长至1.2～1.5cm，重复继代培养3～4次，获得扩繁后的穗芽；5)在不损害生长点的情况下，将穗芽从基部自芽块上拆分下来，将穗芽单独直接扦插到培养基质中，培养7天后，待单独的穗芽生根并发育成独立的幼苗，将幼苗连同培养基质栽植于温室或大田。