[发明专利]一种海洋细菌活菌粉剂的制备方法与用途

摘要

本发明是一种海洋细菌活菌粉剂的制备方法，其步骤是选用海洋细菌L₁-9制备菌株种子液，然后用装有发酵培养基的发酵罐中对L₁-9菌株种子液进行发酵，制备L₁-9菌株发酵液；按饱和吸附量向海洋细菌L₁-9的发酵液中加入载体硅藻土，使载体吸附菌体，菌体形成芽孢后，离心，沉淀烘干，即得LL₁-9菌株菌粉；向菌粉中加入稳定剂和保护剂，气流粉碎机粉碎过300目筛，密封28℃保存，即得成品海洋细菌活菌粉剂。本发明方法采用现有的海洋细菌制成菌粉剂，其可操作性强。制得的菌粉剂的性质和稳定性好，活菌数含量可以达到2.43x10¹⁰cfu/g，细度为300目，活菌粉剂对黄瓜幼苗生长具有明显的促进作用，黄瓜枯萎病有较高的防治效果。

主权项

一种海洋细菌活菌粉剂的制备方法，其特征在于，其步骤如下：（1）海洋细菌L1‑9菌株种子液的制备：向活化的L1‑9菌株斜面加入9ml无菌水冲洗，用接种环充分涂刮制成菌悬液，吸取3ml接入50ml的PD培养基中，在28℃，160rpm条件下摇床培养24h，调整浓度为109个细胞/mL作为种子液；（2）发酵：用装有发酵培养基的发酵罐对L1‑9菌株种子液进行发酵，制备L1‑9菌株发酵液；发酵条件为：接种量7%、温度28℃、搅拌速度200rpm、通气量3L/min、发酵时间36h，生物量达2.40×1010cfu/mL；按饱和吸附量向海洋细菌L1‑9的发酵液中加入载体硅藻土，每间隔1h搅拌一次，使载体充分吸附菌体，48h后菌体形成芽孢后，离心，沉淀于60℃电热恒温鼓风干燥箱烘干，即得L1‑9菌株菌粉；种子培养基和发酵培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，水1000mL，自然pH；（3）成品制备：按以下重量百分比向菌粉中加入稳定剂和保护剂制成海洋细菌活菌粉剂：硅藻土10%，荧光素钠5%，糊精0.5%；气流粉碎机粉碎过300目筛，密封28℃保存。