[发明专利]一种具有靶向和可视化双功能的电化学细胞传感器及其制备方法

摘要

本发明公开了具有靶向和可视化双功能的电化学细胞传感器及其制备方法，本发明通过建立三维碳纳米管(3D-MWCNTs)结构增大与靶向小分子的有效结合面积，选择氧化铟锡导电玻璃(ITO)作为电极，基于三价砷与相邻巯基特异性结合的特点，合成新型靶向小分子AsC₈H₁₀NS₂作为探针，对肿瘤细胞膜上的相邻巯基蛋白进行靶向识别，利用电化学方法实现传感器对肿瘤细胞的定性和定量检测，通过显微镜技术直接观测捕获肿瘤细胞的状态，成功的构建了靶向、可视化双功能的电化学生物传感器。

主权项

一种具有靶向和可视化双功能的电化学细胞传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)多壁碳纳米管的功能化：首先将多壁碳纳米管在体积比3:1的硫酸和硝酸混合液中超声16个小时，用去离子水多次过滤洗涤至滤液为中性，真空条件下烘干，得到功能化的多壁碳纳米管；(2)ITO玻璃表面预处理：首先将ITO玻璃依次放入二次蒸馏水、丙酮、异丙醇、乙醇、二次蒸馏水中各超声洗涤15‑20min，再在体积比1:1的氨水:双氧水溶液中煮沸30‑40min；(3)ITO电极表面氨基化：冰浴条件下将10mM对苯二胺溶液加入到1M NaNO₂溶液中，避光反应3min合成重氮阳离子溶液，倒入电解池中，采用三电极体系，ITO玻璃作为工作电极，饱和甘汞电极作为参比电极，铂丝作为对电极，在0.4—‑0.6V，扫速100mV s^‑1扫两圈，利用重氮化反应原理将对苯二胺嫁接到ITO表面，‑0.6V沉积2min，然后0.4V—‑0.6V,100mV s^‑1扫一圈钝化ITO电极，得到氨基修饰的ITO电极，记为AP/ITO电极；(4)三维碳纳米管结构的搭建和靶向小分子A_SC₈H₁₀NS₂的组装：将功能化的多壁碳纳米管和ASC8H10NS2小分子探针共同溶解在0.2mgmL^‑1DMSO中，加入HATU多肽缩合试剂，超声反应30‑40min，将AP/ITO电极浸泡在上述溶液中，真空干燥箱65℃密封反应24h，得到ASC8H10NS2@3D‑MWCNTs/ITO电极，用环氧树脂胶将ITO表面进行封闭。