[发明专利]一种淡水蟹血淋巴中总RNA的高效提取方法无效
申请号: | 201410293204.9 | 申请日: | 2014-06-27 |
公开(公告)号: | CN104031910A | 公开(公告)日: | 2014-09-10 |
发明(设计)人: | 王成辉;兹元吉 | 申请(专利权)人: | 上海海洋大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京知本村知识产权代理事务所 11039 | 代理人: | 刘江良 |
地址: | 201306 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种淡水蟹,尤其是河蟹血淋巴中总RNA的高效提取方法,其步骤包括:(1)血淋巴采取:以1mL总体积的灭菌针头从河蟹步足基部吸取河蟹血淋巴;(2)总RNA提取:将吸取的血淋巴用Trizol试剂处理,离心取上清,加氯仿,然后离心取上清,加异丙醇,再离心,然后去除上清液后加75%乙醇洗涤RNA,离心后干燥沉淀后保存。本发明方法可简便、快速、高效地提取河蟹血淋巴中RNA。提取的RNA数量多、质量高,不受蛋白质的污染,可用于各种分子生物学分析,有较强的应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 淡水 淋巴 rna 高效 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种淡水蟹血淋巴中总RNA的高效提取方法,其特征在于包括如下步骤:(1)取无菌离心管并加入1mL Trizol试剂,置于碎冰上;(2)血淋巴抽取;(3)提取总RNA,步骤如下:将第(2)步抽取的河蟹血淋巴加入第(1)步的离心管中,将血淋巴组织与Trizol试剂混匀,室温静置3‑10分钟;离心,取上清液加入氯仿;离心,取上清液加入异丙醇;离心后弃上清液,沉淀RNA加入75%酒精;离心后弃上清液;干燥沉淀RNA;沉淀中加入RNase‑free水溶解。
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