[发明专利]一种薄膜蒸发法制备载细胞因子和骨蛋白微球的方法

摘要

本发明公开了一种载细胞因子和骨形态发生蛋白微球的制备方法，包括以下步骤：膜材配料，将注射用卵磷脂、胆固醇、十八胺或维生素E按配料比进行配比；微球成膜，将配比的膜材原料混合于有机溶剂中，加入到旋转蒸发仪的茄形反应瓶中，以恒定的温度、真空度和旋转速度形成薄膜；待包裹蛋白溶液，向缓冲溶液中加入细胞因子蛋白和骨形态发生蛋白，获得蛋白溶液；水化，加入蛋白溶液水化薄膜；高压匀浆，将包裹了蛋白的粗制微球进行高压匀浆获得脂质体溶液；冷冻干燥，加入冻干保护剂后，将脂质体溶液放在冰箱中先预冷，再进行真空干燥，制备微球的冻干品；再水合，将载蛋白的微球冻干品加入注射用水，震荡水合获得乳白色溶液。

主权项

一种载细胞因子和骨形态发生蛋白微球的制备方法，包括以下步骤：(1)膜材配料，将注射用卵磷脂、胆固醇、十八胺或维生素E按配料比进行配比；(2)微球成膜，将配比的膜材原料混合于有机溶剂中，加入到旋转蒸发仪的茄形反应瓶中，以恒定的温度、真空度和旋转速度形成薄膜；(3)制备待包裹蛋白溶液，向缓冲溶液中加入细胞因子蛋白和骨形态发生蛋白；(4)水化，加入步骤3中制备的含蛋白缓冲溶液水化步骤2获得的脂质薄膜，经震荡、水浴超声获得包裹了蛋白的粗制微球；(5)高压匀浆，将包裹了蛋白的粗制微球进行高压匀浆，获得包裹蛋白的脂质体微球乳浊液；(6)冷冻干燥，将步骤5制备的乳浊液放在冰箱中先预冷，再进行真空干燥，制备微球的冻干品；(7)再水合，将载蛋白的微球冻干品加入注射用水，震荡水合获得乳白色溶液；(8)检测冻干脂质微球蛋白的包封率和蛋白含量，将乳白色溶液加水进行水化，用凝胶柱，分离脂质微球和未包封的蛋白，并按Lowry法测定第二峰中的蛋白质含量。