[发明专利]一种全营养微生物生防有机肥的制备方法与应用

摘要

本发明涉及一种全营养微生物生防有机肥的制备方法与应用，包括如下步骤：(1)将拟康氏木霉TRIPI和黑根霉RN-9进行平板培养；(2)将拟康氏木霉TRIPI和黑根霉RN-9菌丝块进行PDB液体培养；(3)将液体培养液进行发酵培养，制得发酵液；(4)将农家肥原料接种发酵液，混合均匀，经堆料发酵，制得发酵料；(5)向发酵料中加入其他成分，混合均匀，制得全营养微生物生防有机肥；本发明制备的全营养微生物生防有机肥对病原菌的抑制率较高，对黄瓜枯萎病的相对防效较高，与单一菌种发酵液制备的生防有机肥相比，黄瓜根际土壤、黄瓜根系、黄瓜茎秆中的病原菌含量较低，并且黄瓜叶片防御酶的反应快，酶活高，持续时间长。

主权项

一种全营养微生物生防有机肥的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将拟康氏木霉(Trichoderma pseudokiningii)TRIPI和黑根霉(Rhizopus nigricans)RN‑9接种于PDA平板培养基上进行平板培养；(2)将步骤(1)平板培养后的拟康氏木霉(Trichoderma pseudokiningii)TRIPI和黑根霉(Rhizopus nigricans)RN‑9菌丝块转接至PDB培养基中，进行PDB液体培养，制得液体培养液；(3)将步骤(2)制得的液体培养液按体积比为1:(1～3)接种于麸皮葡萄糖培养基中，经发酵培养，制得发酵液；上述麸皮葡萄糖培养基每升组分如下：麸皮50～70克，葡萄糖20克，琼脂18‑20克，水定容至1L；(4)将农家肥原料干料粉碎后，按干重的30～50wt％加水，混合均匀，然后按农家肥原料干料的干重的1.5～5wt％接种步骤(3)制得的发酵液，混合均匀，经堆料发酵3～5天，制得拟康氏木霉(Trichoderma pseudokiningii)TRIPI和黑根霉(Rhizopus nigricans)RN‑9的孢子数之和不小于0.5亿/克的发酵料；(5)按步骤(4)制得的发酵料质量的0.02％～0.05％加入甲壳素、7.0％～8.0％加入尿素、0.5％～1.5％加入硫酸钙(CaSO₄)、5.0％～12.0％加入三水合磷酸氢二钾(K₂HPO₄·3H₂O)、1.0％～5.0％加入凹凸棒土，混合均匀，然后按步骤(4)制得的发酵料质量的1％～5％加入甲基纤维素、1％～5％加入羧甲基纤维素钠、1％～5％加入乙基纤维素，混合均匀，制得全营养微生物生防有机肥；所述步骤(1)中的拟康氏木霉(Trichoderma pseudokiningii)TRIPI购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，菌种保藏编号CGMCC NO.1443；黑根霉(Rhizopus nigricans)RN‑9于2013年11月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号CGMCC NO.8436，保藏地址：北京市海淀区中关村北一条13号，中国科学院微生物研究所。