[发明专利]一种荧光比率测量系统及方法

摘要

本发明公开了一种荧光比率测量系统及方法，该系统基于典型的马赫‑曾德尔干涉仪光路采集样品受激发射时的荧光信号，由光路中的分光镜将样品受激发射的荧光信号分解为透射光束和反射光束，分别在两束光的传播光路中放置干涉滤光片和互补通光光栏，由单一CCD同时采集两束不同发射波长的荧光信号强度。通过标准样品组建立待测物理量与两束不同发射波长荧光信号强度比率之间的标准曲线，进而由待测样品测得的荧光比率，应用预先建立的标准曲线确定样品待测物理量。本发明适用于所有的基于荧光比率的测量系统，包括传统的单一CCD两次采集、双CCD同时采集获取荧光比率的情形。本发明在pH值、温度及厚度等测量领域具有广泛应用。

主权项

一种荧光比率测量系统，其特征在于：包括用于提供激发光波的光源(1)、准直扩束透镜组(2)、激发滤光片(3)、二色分光镜(4)、用于产生受激发射荧光的样品(5)中的第一荧光染料(6)和第二种荧光染料(7)、用于分光的第一分光镜(8)和第二分光镜(15)、用于获得第一发射波长荧光的第一发射滤光片(9)和第二发射波长荧光的第二发射滤光片(12)、用于获得两束荧光信号强度图像分布面积相等且对称的第一互补通光光栏(11)和第二互补通光光栏(14)；用于进行图像采集的调焦镜头(16)和单一CCD(17)、用于进行图像存储及处理的计算机(18)；光源(1)发出的激发光波经准直扩束透镜组(2)的准直和扩束后，传向激发滤光片(3)，通过激发滤光片(3)的透射光经二色分光镜(4)的反射后，在标准样品(5)表面入射；样品(5)受激发射荧光透过二色分光镜(4)传播到第一分光镜(8)被分为透射光与反射光，沿透射光的传播方向依次放置有第一发射滤光片(9)、第一反射镜(10)、第一互补通光光栏(11)；沿第一分光镜(8)的反射光传播方向依次放置有第二发射滤光片(12)、第二反射镜(13)、第二互补通光光栏(14)；通过第一互补通光光栏(11)后的第一发射波长荧光OⅠ经第二分光镜(15)的反射，通过第二互补通光光栏(14)后的第二发射波长荧光OⅡ经第二分光镜(15)的透射，反射和透射的荧光经置于第二分光镜(15)后调焦镜头(16)的聚焦，在CCD(17)上形成两幅荧光信号强度图像，并存储在计算机(18)上。