[发明专利]一种快速鉴别杂交水牛染色体核型的方法有效

专利信息
申请号: 201410332529.3 申请日: 2014-07-14
公开(公告)号: CN104152549A 公开(公告)日: 2014-11-19
发明(设计)人: 熊家军;杨利国;苏皖中;刘青;刘孝然;张华林;张祖翔;杨菲菲;潘斌 申请(专利权)人: 华中农业大学;湖北劲牛牧业有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 代理人: 徐绍新
地址: 430070 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明属于家畜分子标记育种技术领域,具体涉及一种快速鉴别杂交水牛染色体核型的方法。本发明根据水牛RBP3基因的两个突变位点,其核苷酸序列分别如序列表SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示,设计出两对引物,对杂交水牛的DNA进行PCR扩增,得到两种扩增产物;最后对所得到的扩增产物进行酶切、分型,从而快速、准确地辨别杂交水牛的三种核型。本发明首次证明上述两个突变位点与杂交水牛染色体核型相关,并且可以利用这两个突变位点快速鉴别杂交水牛的染色体核型,可以作为杂交水牛的分子标记选育手段,加速杂交水牛的选育效率。
搜索关键词: 一种 快速 鉴别 杂交 水牛 染色体 核型 方法
【主权项】:
一种快速鉴别杂交水牛染色体核型的方法,其特征在于包括以下步骤:1)提取杂交水牛的总DNA;2)根据水牛RBP3基因的两个突变位点的核苷酸序列,设计两组引物对——RBP3‑1引物对和RBP3‑2引物对,其中:RBP3‑1的正向引物为5’‑GTGCCGCTGCTACTCTCTTACT‑3’,RBP3‑1的反向引物为5’‑TCCTTACCTATGTGACGCTTGACG‑3’;RBP3‑2的正向引物为5’‑AACACCTATCCACGACCTTTATCAT‑3’,RBP3‑2的反向引物为5’‑AGTTGCTTTAGCGAAGACACTATTATC‑3’;3)分别用步骤2)中的两组引物对杂交水牛的DNA进行PCR扩增,得到两种扩增产物;4)分别对步骤3)所得到的两种扩增产物进行酶切、分型:RBP3‑1引物对的扩增产物选用Ecil内切酶,酶切条带中出现2条带确认为2N=50核型;RBP3‑2引物对的扩增产物选用Drdl内切酶,酶切条带中出现1条带确认为2N=48核型,酶切条带中出现3条带确认为2N=49核型。
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