[发明专利]一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用有效
| 申请号： | 201410346343.3 | 申请日： | 2014-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN104099363A | 公开（公告）日： | 2014-10-15 |
| 发明（设计）人： | 巩元勇;倪万潮;郭书巧;束红梅;沙琴 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 吴开磊 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市溧水*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物载体领域，特别涉及一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用。构建方法，包括以下步骤：构建aroA基因敲除打靶片段；将pKD46质粒转入BL21(DE3)菌株，获得BL21(DE3)/pKD46菌株；将aroA基因敲除打靶片段转化至该菌株，获得BL21(DE3)ΔaroA菌株。本发明提供的一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法，采用大于500bp的同源侧翼序列，利用Red同源重组技术成功的敲除BL21(DE3)菌株的aroA基因；该菌株既可用于EPSPS功能互补验证，还实现了pET系统重组外源蛋白的大量表达，达到一举两得的效果。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 bl21 de3 aroa 菌株 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：构建aroA基因敲除打靶片段；将pKD46质粒转入BL21(DE3)菌株，获得BL21(DE3)/pKD46菌株；将aroA基因敲除打靶片段转化进入BL21(DE3)/pKD46菌株，获得所述BL21(DE3)ΔaroA菌株。
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