[发明专利]槲皮素及其衍生物在磷酸化蛋白质荧光检测中的应用有效
申请号: | 201410347228.8 | 申请日: | 2014-07-15 |
公开(公告)号: | CN105319188B | 公开(公告)日: | 2018-04-20 |
发明(设计)人: | 金利泰 | 申请(专利权)人: | 温州安得森生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 325035 浙江省温*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及磷酸化蛋白质荧光检测技术,具体地说是槲皮素及其衍生物在磷酸化蛋白质荧光检测中的应用。本发明还提供了应用槲皮素进行磷酸化蛋白质荧光检测的方法,包括步骤将蛋白质样品电泳后的凝胶在固定液中固定,去离子水冲洗;染色;脱色;检测。本发明具有灵敏度高、特异性强、操作简单迅速、重现性好、染色背景好、线性关系好、可逆性好、兼容性好、使用安全、成本低等优点。 | ||
搜索关键词: | 槲皮素 及其 衍生物 磷酸化 蛋白质 荧光 检测 中的 应用 | ||
【主权项】:
一种磷酸化蛋白质荧光特异性检测方法,所述特异性比Stains‑All和Pro‑Q Diamond染色法强,其包括步骤:1)将经SDS‑PAGE电泳后的蛋白质样品凝胶置于固定液中固定10~60min,弃固定液,然后用去离子水冲洗1~20min;2)加入荧光染色液染色1~120min,其中所述染色液为含按摩尔浓度比5~50μM的槲皮素,按摩尔浓度比5~100μM的铝离子,按溶液体积比10~30%的1,2‑丙二醇,以及按溶液体积比10~50%的甲醇;3)将染色完毕的凝胶置于脱色液中脱色1~10min,其中所述脱色液为含按溶液体积比10~50%的甲醇,按摩尔浓度比50~500mM乙酸钠,用乙酸将溶液pH调节至4~5;4)检测。
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