[发明专利]猪背膘厚相关SLC13A5基因的分子克隆及应用

摘要

本发明属于家畜分子分子生物学技术领域，具体涉及猪SLC13A5基因的分子克隆及应用。本发明所述的分子标记由SLC13A5基因克隆得到，其SLC13A5分子标记的序列如SEQ ID NO1所示。SLC13A5基因的多态性是利用比较基因组学方法根据人的SLC13A5基因序列设计引物，以猪的基因组DNA为模板扩增，扩增片段利用测序筛选SNP，并利用PCR－RFLP进行基因分型，发现第251bp处有一个T/C的碱基突变，导致PCR‑RFLP‑Bsu36I多态性，并利用该标记检测了中外猪种的情况。本发明为猪标记辅助选择提供了新的分子标记。

主权项

如序列表SEQ ID NO：1所示与猪背膘厚相关的SLC13A5基因作为分子标记在猪背膘厚性状辅助选择中的应用，其特征在于，检测如序列表SEQ ID NO：1所示与猪背膘厚相关的SLC13A5基因，序列表SEQ ID NO：1的251bp处有一个A/G的SNP，导致PCR‑RFLP‑Bsu 36 I多态性，结果显示在SLC13A5基因的A/G位点存在3种基因型，AA、AG和GG基因型在校正日龄和校正背膘厚差异显著，即基因型AA型可降低背膘厚，按照以下步骤：利用正向引物为5′‑CTCATTCCTGCGTCTTATTC‑3′，反向引物为5′‑GCTGTGGGTGGTGTCATT‑3′的引物进行PCR扩增，PCR产物用1％琼脂糖凝胶电泳检测，利用限制性内切酶Bsu 36 I对PCR产物进行酶切鉴定，最后用2％琼脂糖凝胶电泳检测AA、AG和GG基因型。