[发明专利]一种检测小麦条锈菌促分裂原活化蛋白激酶1基因(Mapk1)SNP位点的方法无效
申请号: | 201410353110.6 | 申请日: | 2014-07-21 |
公开(公告)号: | CN104141010A | 公开(公告)日: | 2014-11-12 |
发明(设计)人: | 李明菊;陈万权;李昊星;刘太国;段霞瑜;程加省;徐志;毕云青;张庆;许韬 | 申请(专利权)人: | 云南省农业科学院农业环境资源研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 650201 云南*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 一种检测小麦条锈菌促分裂原活化蛋白激酶1基因(Mapk1)SNP位点的方法,使用本发明的专用引物对条锈菌DNA进行PCR扩增,然后测序,经过与标准序列比对,从而检测到所测序列的SNP位点,其中专用引物为:正向引物:Map1351S:5'GTCGGTCGGGTGTATCCT3';反向引物:Map1683A:5'GGTT CATCTTCGGGGTCA3'。PCR反应体系:为20μl,其中,样品DNA,20ng/μl,1μl;Primer S和A(10μM)各1μl;2×Taq PCR MasterMix,10μl;ddH2O,7μl。2×Taq PCR MasterMix成分:0.1U Taq Polymerase/μl,500μM dNTP ea ch,20mMTris-HCl(PH8.3),100mM KCl,3mM MgCl2,其它稳定剂和增强剂。PCR反应程序:(96℃,5min)1cycle;(96℃,25s,55℃,25s,72℃,45s)34cycles;72℃延伸5min。本发明技术方案操作简单,耗时少,且测序结果比指纹结果更为可靠,更能揭示分子水平上的细节问题,为我们研究提供更多的信息。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 小麦 锈菌 分裂 活化 蛋白激酶 基因 mapk1 snp 方法 | ||
【主权项】:
一种检测小麦条锈菌促分裂原活化蛋白激酶1基因(Mapk1)SNP位点的方法,其特征为使用专用引物对条锈菌DNA进行PCR扩增,然后测序,经过与标准序列比对,从而检测到所测序列的SNP位点,所述的专用引物为:正向引物:Map1351S:5'GTCGGTCGGGTGTATCCT3';反向引物:Map1683A:5'GGTTCATCTTCGGGGTCA3'。
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