[发明专利]一种利用MFH融合蛋白制备GLP-1多肽或其类似物方法和应用有效
申请号: | 201410353241.4 | 申请日: | 2014-07-23 |
公开(公告)号: | CN104098702A | 公开(公告)日: | 2014-10-15 |
发明(设计)人: | 苏正定;吴刚;赵以军;李祝 | 申请(专利权)人: | 湖北工业大学 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/70;C07K1/30;C07K1/22;C07K1/20;C07K14/605;C12P21/06;A61K38/26;A61P3/10 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 常海涛 |
地址: | 430068 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用MFH融合蛋白制备GLP-1多肽或其类似物方法和应用,属于生物技术领域。GLP-1多肽或其类似物的MFH融合蛋白的结构式为MFH-DP-H6-E7-PEP,其中,MFH为蛋白融合载体;DP为甲酸水解位点;H6为组氨酸标签;E7为专一性蛋白酶切位点;PEP为GLP-1多肽或其类似物。将编码DP-H6-E7-PEP的DNA连接到pMFH质粒上再转入大肠杆菌,通过原核表达得到MFH-DP-H6-E7-PEP融合蛋白,利用甲酸水解、专一性蛋白酶水解和亲和层析得到GLP-1多肽或其类似物。本发明达到了多肽大规模高效表达、多肽释放工艺步骤少、条件温和、生产成本低的目的,适合工业化生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 mfh 融合 蛋白 制备 glp 多肽 类似物 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种GLP‑1多肽或其类似物的MFH融合蛋白,其特征在于结构式为:MFH‑DP‑H6‑E7‑PEP;其中,MFH为蛋白融合载体;DP为L‑天冬氨酸‑L‑脯氨酸序列;H6为组氨酸标签,序列为L‑组氨酸1‑L‑组氨酸2‑L‑组氨酸3‑组氨酸4‑L‑组氨酸5‑L‑组氨酸6;E7为专一性蛋白酶切位点,其序列为:L‑谷氨酸1‑L‑天冬氨酸2‑L‑亮氨酸3‑L‑酪氨酸4‑L‑苯丙氨酸5‑L‑谷氨酰胺6‑L‑X,X为除脯氨酸以外的任意L‑型氨基酸;PEP为GLP‑1多肽或其类似物,GLP‑1的类似物包括R34,GLP‑1多肽和R34的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1和2所示。
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