[发明专利]快速监控混种酵母增殖的方法

摘要

本发明提供了基于GeXP遗传分析系统(原理是毛细管电泳技术)平台的检测方法，用于啤酒的混种酵母的增殖规律和混种比例。快速监控混种酵母增殖的方法，包括引物设计、PCR扩增反应、GeXP毛细管电泳检测、制作标准曲线、实时监控发酵液和优化混种酵母比例。根据这种方法，研究人员可以了解混种发酵过程中不同酵母的生长曲线和增殖规律以及不同酵母之间的相互影响，从而进一步为调控混种比例和保持最佳发酵性能提供技术保证。

主权项

快速监控混种酵母增殖的方法，其特征在于：包括引物设计、PCR扩增反应、GeXP毛细管电泳检测、制作标准曲线和实时监控发酵液；具体检测步骤如下：①引物设计：搜索Lager啤酒酵母基因组序列中的差异片段，并根据差异片段设计区分不同酵母的引物；②PCR扩增反应：分别用提取的纯种酵母DNA和步骤①设计的引物配制PCR反应体系，上PCR反应仪，扩增得到不同纯种酵母的特异产物，即为PCR产物；③GeXP毛细管电泳检测：采用GeXP毛细管电泳检测稀释后的PCR产物并分析，确定纯种酵母的特征峰；④制作标准曲线：(a)提取两种纯种酵母的DNA，将二者按照不同比例混合，得到不同混合比例的混种酵母DNA，所述混合比例为质量百分比；(b)对不同混合比例的混种酵母进行GeXP毛细管电泳检测，得到特征峰的峰高HT以及两种酵母共有峰的峰高HB；(c)根据混合比例和HT/HB比值，制作标准曲线；⑤实时监控发酵液：对由步骤④的两种纯种酵母组成的混种发酵样品提取DNA，进行PCR反应，将稀释后的PCR产物进行GeXP毛细管电泳检测，得到检测样品的HT/HB比值，通过步骤④制作的标准曲线计算酵母中两种酵母的混合比例。