[发明专利]一种利用扩增DNA片段长度多态性测定短链RNA的方法有效
| 申请号： | 201410362696.2 | 申请日： | 2014-07-28 |
| 公开（公告）号： | CN104120184A | 公开（公告）日： | 2014-10-29 |
| 发明（设计）人： | 徐凯;唐放;张耀艺;冯梓浩;杨宇;吴秀锦;张菲菲 | 申请（专利权）人： | 成都诺恩生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 杨兵 |
| 地址： | 610041 四川省成*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用扩增DNA片段长度多态性测定短链RNA的方法，属于分子生物技术领域，包括以下步骤：首先利用至少两种与待测短链RNA相比无天然同源序列的合成小RNA作为测定的内标，将这些合成小RNA以不同分子数混合，形成动态小RNA标准分子梯度；再以等量的所述动态小RNA标准与所述待测短链RNA混合，经由RNA反转录、cDNA加尾、PCR同步扩增及PCR产物DNA长度多态性片段的荧光定量分析，测得所述待测短链RNA扩增产生的DNA片段荧光强度在所述动态小RNA标准荧光强度梯度上的相对比例，本方法可以实现对短链RNA尤其是miRNA的绝对定量，且具有高特异性、高灵敏度、结果客观、重复性好，可在100-106拷贝数范围内准确定量，也适用于RNA粗提物。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 扩增 dna 片段 长度 多态性 测定 rna 方法 | ||
【主权项】：
一种利用扩增DNA片段长度多态性定量测定短链RNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：首先利用至少两种与待测短链RNA相比无天然同源序列的合成小RNA作为测定的内标，将这些作为内标的所述合成小RNA以不同分子数混合，形成动态小RNA标准分子梯度；再以等量的所述动态小RNA标准与所述待测短链RNA混合，经由RNA反转录、cDNA加尾、PCR同步扩增及PCR产物DNA长度多态性片段的荧光定量分析,测得所述待测短链RNA扩增产生的DNA片段荧光强度在所述动态小RNA标准荧光强度梯度上的相对比例，从而实现所述待测短链RNA的相对定量。
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