[发明专利]一种荷叶离褶伞菌丝体富硒胞内粗多糖的发酵工艺

摘要

本发明公开了一种荷叶离褶伞菌丝体富硒胞内粗多糖的发酵工艺，采用价格较低的无机Na2SeO3作为硒源，以液体发酵培养的方式，在用马铃薯葡萄糖制备的液体培养基中加入Na2SeO3溶液，通过荷叶离褶伞菌丝体的富集转化为有机硒，降低了硒的毒性，提高菌丝体的利用价值；将Na2SeO3在液体培养基的发酵中期加入，有效地降低硒对延滞期荷叶离褶伞菌丝体的抑制和毒害作用，提高荷叶离褶伞菌丝体中富硒胞内多糖的积累量。通过单因素试验和Box-Behnken试验设计以及响应面分析法，对富硒荷叶离褶伞胞内粗多糖发酵条件进行优化，得出最佳发酵条件，得到胞内粗多糖与各发酵条件各因素变量的二次回归方程模型，该模型回归极显著，对试验拟合较好，有一定的应用价值。

主权项

一种荷叶离褶伞菌丝体富硒胞内粗多糖的发酵工艺，其特征在于：具体包括以下步骤：a)       菌种活化将荷叶离褶伞母种菌块接入新鲜的固体培养基上，置于22℃恒温培养箱中培养15d后，再转接一次，22℃培养15d，备用；b)      液体培养基制备将200g马铃薯洗净，去皮挖眼，切成2cm2的小块，加水煮沸20~30min，至马铃薯小块煮烂能被玻璃棒戳破即可，过300目筛得滤液，取其滤液800~900mL加入20g葡萄糖，使葡萄糖溶化后加水至1000mL定容，备用；c)       荷叶离褶伞菌丝体富硒胞内粗多糖的发酵生产取100mL步骤b制备的液体培养基置于115~121℃下灭菌15~30min，冷却后接入6片直径为6mm荷叶离褶伞活化菌种块，接种后放在20~25℃、121rpm下培养发酵，发酵期间加入同等条件下灭菌的Na2SeO3溶液，使硒在液体培养基中的浓度为0~10ug/mL，然后继续在20~25℃、121rpm下培养，每天测定荷叶离褶伞菌丝体富硒胞内粗多糖的含量。