[发明专利]基于木质素代谢通路关键酶的工程菌及其实现方法在审
申请号: | 201410374644.7 | 申请日: | 2014-07-31 |
公开(公告)号: | CN104152390A | 公开(公告)日: | 2014-11-19 |
发明(设计)人: | 周培;冯海玮;孙玉静;支月娥;罗艳青 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N9/02;C12N9/08;C12N15/53;C12N15/70;C12R1/465 |
代理公司: | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人: | 王毓理;王锡麟 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 一种基于木质素代谢通路关键酶的工程菌及其实现方法,以灰略红链霉菌基因组DNA经过全基因合成构建得到载体为模板,分别与对应含有酶切位点的引物进行PCR扩增并对应分别得到编码漆酶的核苷酸序列、编码木质素过氧化物酶的核苷酸序列和编码锰过氧化物酶的核苷酸序列;然后将扩增得到的序列依次连接到共表达载体、将扩增得到的序列连接到重组表达载体,最终得到重组共表达载体和重组表达载体;之后将重组共表达载体与重组表达载体先后转化到大肠杆菌表达菌株内,获得转基因共表达菌株。本发明能够应用基因工程手段实现漆酶、木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶体外的大量表达合成,最终应用于实现木质素的原位快速降解。 | ||
搜索关键词: | 基于 木质素 代谢 通路 关键 工程 及其 实现 方法 | ||
【主权项】:
一种木质素代谢通路关键酶的工程菌,其特征在于,该工程菌为通过全基因合成获得的漆酶、木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶基因的重组过表达菌株;所述的木质素代谢通路关键酶是指灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)JSD‐1漆酶、木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶,其中:漆酶的核苷酸序列Lac,如SEQ ID No.1所示,木质素过氧化物酶的核苷酸序列Lip,如SEQ ID No.2所示,锰过氧化物酶的核苷酸序列Mnp,如SEQ ID No.3所示。
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