[发明专利]甘草酸修饰紫杉醇脂质体的制备方法

摘要

甘草酸修饰紫杉醇脂质体的制备方法属于药品技术领域，尤其涉及一种紫杉醇脂质体的合成方法。本发明提供一种操作简单，效率高且环境友好的一种甘草酸修饰紫杉醇脂质体的制备方法。甘草酸修饰紫杉醇脂质体的制备方法，包括下步骤。（1）在冰水浴冷却下，向GL与DM的混合溶液中滴加卞基二环己基异脲与DMF的混合溶液。（2）称取紫杉醇60mg溶于适量磷酸缓冲液，另取注射用豆磷脂1.8g、胆固醇0.6g及适量的磷脂酰甘油、水溶性维生素E溶于5mL乙醇中，（3）精密吸取样品液0.05mL，上葡聚糖凝50色谱柱，以蒸馏水为洗脱液，每份收集2mL，收集30份。（4）取GLOST-PTX脂质体适量，置透析袋中，悬置于盛50mL释放介质的具塞锥形瓶中。

主权项

甘草酸修饰紫杉醇脂质体的制备方法，其特征在于，包括下步骤；（1）在冰水浴冷却下，向GL与DM的混合溶液中滴加卞基二环己基异脲与DMF的混合溶液，反应液在冰水浴冷却下搅拌过夜，生成白色沉淀，反应液过滤，滤液减压浓缩；经硅胶柱层析，得纯化产物6,6‑二卞基甘草酸；将硬脂醇与二环己基烃化二亚胺的混合物在CuCl催化下于85℃搅拌2小时，向混合物中滴加二卞基甘草酸与DMF的混合液，反应液于50℃搅拌3小时；过滤，滤饼用乙酸乙酯润洗，滤液合并，真空干燥得粗品，经硅胶柱层析纯化得化合物‑二卞基‑30‑硬酯醇基甘草酸，将二卞基‑硬酯醇基甘草酸与异丙醇‑乙酸乙酯的混合液在5%Pd‑C催化下常压氢解，反应完毕后，过滤，滤液真空干燥得到目标产物GLOST；（2）称取紫杉醇60mg溶于适量磷酸缓冲液，另取注射用豆磷脂1.8g、胆固醇0.6g及适量的磷脂酰甘油、水溶性维生素E溶于5mL乙醇中，置250mL茄形瓶中，待完全溶解后，65℃旋转薄膜蒸发仪减压蒸馏除去乙醇，在瓶壁上形成均匀的类脂薄膜；带膜的茄形瓶减压干燥8小时，加70mL磷酸缓冲液溶解，将GLOST适量（用无水乙醇溶解）注入其中,探头超声水合20min，过0.22µm滤膜2次，高压均质二次，即得甘草酸修饰紫杉醇脂质体；（3）精密吸取样品液0.05mL，上葡聚糖凝50色谱柱，以蒸馏水为洗脱液，每份收集2mL，收集30份，加脂质体消解液4mL，摇匀、离心,吸取20µL注入液相色谱，计算峰面积，绘制洗脱曲线；1－6mL是空白洗脱液，7‑20mL有乳光带的是脂质体部分，26‑32mL是游离药物，脂质体与药物能够完全分离，取三批样品，上柱分离，收集前20mL洗脱液测定PTX含量，脂质体包封率＝系统中包封药量/系统中包封与未包封总药量×100%，测定包封率均值为86.12%；（4）取GLOST‑PTX 脂质体适量，置透析袋中，悬置于盛50mL 释放介质的具塞锥形瓶中，密塞，置37℃水浴恒温振荡，定时取样，测定PTX 含量，以药物累积释放度对时间线性拟合。