[发明专利]一种临床级胎盘间充质干细胞制备方法有效
| 申请号： | 201410377209.X | 申请日： | 2014-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN105316283B | 公开（公告）日： | 2019-02-12 |
| 发明（设计）人： | 王全磊;商周春;葛玉萍;刘聪;吴亮;董国艺;刘传宇;郑俊强 | 申请（专利权）人： | 深圳华大基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12N5/0735 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 马莉华;崔佳佳 |
| 地址： | 518083 广东省深圳市盐田*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种临床级胎盘间充质干细胞的制备方法，具体地，本发明方法包括：对经剪碎的胎盘组织材料，用组合消化酶进行消化，从而获得经消化的组织混合物，其中所述的组合消化酶包括胶原酶IV和胰蛋白酶；加入红细胞裂解液，从而获得经红细胞裂解处理的混合物；离心，获得沉淀，即为原代间充质干细胞；对上一步骤的所述原代间充质干细胞进行无血清传代扩增，从而获得经传代的临床级胎盘间充质干细胞。本发明方法制备的细胞其细胞纯度高、增殖能力强、可保证细胞临床使用需要。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 临床 胎盘 间充质 干细胞 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种临床级胎盘间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：(a)对获得的含间充质干细胞的胎盘组织材料，进行剪碎处理，从而获得经剪碎的胎盘组织材料；(b)对上一步骤获得的经剪碎的胎盘组织材料，用组合消化酶进行消化，从而获得经消化的组织混合物，其中所述的组合消化酶包括终浓度为50U/ml‑100U/ml胶原酶IV和0.005wt％‑0.01wt％胰蛋白酶；(c)从所述经消化的组织混合物中，取上清悬浮液；(d)对上一步骤的所述上清悬浮液进行离心，获得沉淀；(e)对上一步骤的所述沉淀，加入1‑2ml红细胞裂解液，从而获得经红细胞裂解处理的混合物；(f)对上一步骤的所述经红细胞裂解处理的混合物，进行离心，获得沉淀，即为原代间充质干细胞；(g)对上一步骤的所述原代间充质干细胞进行无血清扩增传代，从而获得经传代的临床级胎盘间充质干细胞；其中，在步骤(b)中，胶原酶IV和胰蛋白酶同时加入；且消化条件包括：在37±2℃下进行消化；消化12‑18小时。
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