[发明专利]一种利用SSR指纹图谱鉴别白蜡种的方法无效
| 申请号： | 201410380064.9 | 申请日： | 2014-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN104164503A | 公开（公告）日： | 2014-11-26 |
| 发明（设计）人： | 燕丽萍;李丽;刘翠兰;刘桂民;王振猛;夏阳 | 申请（专利权）人： | 山东省林业科学研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 李健康 |
| 地址： | 250014 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用SSR指纹图谱鉴别白蜡种的方法，步骤包括：(1)白蜡总DNA提取，(2)SSR序列PCR扩增，(3)PCR扩增产物电泳、染色及鉴定；其中：步骤(2)公开的4对SSR引物组合即可将白蜡DNA进行PCR扩增，获得扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测条带差异性明显的结果，并以此构建了白蜡种的SSR指纹图谱。本发明方法从分子水平上对白蜡种质资源进行了准确鉴定，解决了白蜡种质鉴定困难的问题，且检测时间短、重复性好、准确性高、在收集的12个种中具有专一性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 ssr 指纹 图谱 鉴别 白蜡 方法 | ||
【主权项】：
一种利用SSR指纹图谱鉴别白蜡种的方法，步骤包括：(1)白蜡总DNA提取，(2)SSR序列PCR扩增，(3)PCR扩增产物电泳、染色及鉴定；其中：步骤(1)所述的白蜡总DNA提取，采用CTAB法，步骤(3)所述PCR扩增产物电泳采用6％聚丙烯酞胺凝胶电泳，染色采用银染法染色，鉴定采用统计电泳带型，构建供试材料SSR指纹图谱，进行白蜡种质鉴定；其特征在于：步骤(2)所述SSR序列PCR扩增是以步骤(1)提取的白蜡总DNA样品为模板，采用如下4对引物进行SSR‑PCR扩增：引物对1：上游：5‘TGTTCGGTTTCCTTGCTC’3下游：5‘AAAGAGGGCTGCTGGAGT’3；引物对2：上游：5‘ACTTGTAATGCTGGGAGG’3下游：5‘AATTCCAGTGGTAGAGGC’3；引物对3：上游：5‘TGGTGGAAACAAGATGGG’3；下游：5‘CTCGGGACAGAATGGATG’3引物对4：上游：5‘AGCAGCATTTATGAATGTTC’3下游：5‘ATCAACTGAAGATGACGACG’3。
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