[发明专利]一种土霉素季铵盐的制备方法

摘要

本案公开了一种土霉素季铵盐的制备方法，它包括孢子制备、种子制备、发酵、酸化、纯化、脱色、成盐、重结晶、过滤干燥等工艺步骤。本案通过对生产工艺的改进，可以在温和环保的条件下，将土霉素一步反应成季铵盐，并且其可以在反应体系中以沉淀形式析出，为后续分离提纯提供方便；同时，采用全新的重结晶体系，工艺简单，提纯效率高，避免了通过氨水调节pH至等电点来使产物沉淀的旧工艺。

主权项

一种土霉素季铵盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)孢子制备：将保存在砂土管的龟裂链丝菌种经无菌手续接入麸皮、琼脂和水组成的斜面培养基中，在36.5～36.8℃、55％的相对湿度条件下培养4～5天，并挑选菌落正常的孢子作为种子；步骤2)种子制备：将步骤1)挑选到的孢子接入一级种子罐，在31℃下培养至培养液转为黄色，且培养液的pH值达到6.0～6.4后，将培养液移至二级种子罐，继续在31℃下扩大培养48h；步骤3)发酵：将步骤2)得到的培养液在30～31℃下发酵194h，保持通氧量为0.9v/m，当培养液的pH＜6.4时，开始通入液氨，直至pH在6.4～6.8之间；步骤4)酸化、纯化：使用0.01M的盐酸与0.1M的草酸将步骤3)所得发酵液调节至pH＝1.75～1.80，随后向发酵液中加入0.15wt％硫酸锌、0.05wt％硼砂和0.25wt％的黄血盐以除去蛋白质、铁离子，过滤，得到滤液；步骤5)脱色：将滤液通过122‑2树脂进行脱色；步骤6)成盐：将滤液溶液抽干，加入无水乙醇重新溶解，加入1.2当量的卤代烃，搅拌，加入10wt％的4A分子筛，在0℃下反应4h；步骤7)重结晶：滤得粗品沉淀，洗涤，用正己烷∶无水乙醇＝1∶7的混合溶剂在37℃下溶解，随后静置冷却，直至析出沉淀；步骤8)过滤干燥，称重；在步骤6)中，所述卤代烃为CH₃CH₂Br。