[发明专利]一种基于荧光和比色双重检测体系测定腺苷的方法

摘要

本发明公开了一种基于荧光和比色双重检测体系测定腺苷的方法，属于分析化学技术领域。通过金硫键将巯基DNA连接到金纳米颗粒上，且这巯基DNA可与荧光染料修饰的腺苷核酸适配体杂交。在高盐溶液中由于荧光淬灭，检测体系无荧光或荧光强度很低且稳定存在的金纳米颗粒使溶液颜色为酒红色。腺苷的加入会导致核酸适配体结构的变化，使荧光染料修饰的腺苷适配体从金纳米颗粒上解离下来，荧光染料的荧光恢复。而此时的金纳米颗粒不能稳定存在，溶液颜色则由红色变蓝色。该方法通过检测体系的荧光强度和溶液颜色的变化，实现了对腺苷的定性和定量检测，具有灵敏度高，选择性好等优点。

主权项

一种基于荧光和比色双重检测体系测定腺苷的方法，其特征在于：1)、直径为5‑40nm的金纳米颗粒(AuNPs)的合成；2)、将巯基单链DNA(ssDNA)修饰到AuNPs表面上构成ssDNA‑AuNPs体系；3)、将3′修饰有荧光素的腺苷核酸适配体杂交到上述ssDNA‑AuNPs构成dsDNA‑AuNPs体系；4)、调节dsDNA‑AuNPs体系的盐浓度并对其进行荧光检测及观察溶液颜色；5)、在dsDNA‑AuNPs盐溶液体系中加入目标物腺苷，对其进行荧光检测及观察溶液颜色变化；其中腺苷核酸适配体序列为：5′‑TGGAAGGAGGCGTTATGAGGGGGTCCAGACTG‑荧光素‑3′，5′‑TGGAAGGAGGCGTTATGAGGGGGTCCAGTCAG‑荧光素‑3′，5′‑TGGAAGGAGGCGTTATGAGGGGGTCCAGTGGC‑荧光素‑3′，5′‑TGGAAGGAGGCGTTATGAGGGGGTCCACGCAG‑荧光素‑3′；巯基ssDNA序列为：5′‑SH‑C6‑CAGTCTGGACCC‑3′，5′‑SH‑C6‑CTGACTGGACCC‑3′，5′‑SH‑C6‑GCCACTGGACCC‑3′，5′‑SH‑C6‑CTGCGTGGACCC‑3′。