[发明专利]一种D-阿拉伯糖醇高产酵母突变菌株的筛选方法

摘要

本发明提供一种D-阿拉伯糖醇高产酵母突变菌株的筛选方法，主要以利用低能N⁺离子注入技术对乳酸克鲁维酵母进行诱变而获得的突变菌株为筛选对象，建立了高糖固体培养基初筛，纸色谱法和高效液相色谱法组合使用进行复筛的高通量筛选方法。该方法具有筛选效率高、成本低、筛选周期短、易于操作等优点，为高效筛选经低能离子注入改造酵母所得D-阿拉伯糖醇高产菌株提供了新方法。

主权项

一种D‑阿拉伯糖醇高产酵母突变菌株的筛选方法，其特征在于：该筛选方法包括以下步骤：1)初筛：将经过诱变的出发酵母菌株接种于YPD液体培养基中，然后于28～37℃、160～200r/min下振荡培养24～28h得预培养液，将预培养液涂布于高糖固体培养基上，然后于28～37℃恒温培养48～60h，所述高糖固体培养基含有500～550g/L的葡萄糖；2)复筛：经过恒温培养后，挑取生长于高糖固体培养基上的单菌落并接种于YPD液体培养基中，然后于28～37℃、160～200r/min下振荡培养24～28h得种子培养液，将种子培养液接种于YPD发酵培养基中，然后于160～200r/min、28～37℃下振荡培养96～144h得发酵液，将发酵液离心，将离心得到的上清液用纸色谱法进行分析，根据纸色谱上D‑阿拉伯糖醇对应的显色斑点筛选D‑阿拉伯糖醇产量较高的突变菌株。