[发明专利]一种特异性结合甲胎蛋白核酸适配体的筛选方法有效
| 申请号： | 201410390057.7 | 申请日： | 2014-08-11 |
| 公开（公告）号： | CN104131105A | 公开（公告）日： | 2014-11-05 |
| 发明（设计）人： | 吴伟忠;胡洪卫;郭玮;冬黎黎;谈绮文 | 申请（专利权）人： | 复旦大学附属中山医院;上海艾津生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 金重庆 |
| 地址： | 200032 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种利用毛细管电泳技术筛选甲胎蛋白特异性核酸适配体的方法，包括以下步骤：设计并构建随机寡核苷酸文库，联合毛细管电泳技术与SELEX筛选方法，富集到能与甲胎蛋白结合的寡核苷酸，经克隆、测序、毛细管电泳分析以及免疫荧光验证，最终获得能与甲胎蛋白特异性结合的寡核苷酸，即适配体。本发明提供了一种高效、特异的适配体筛选方法。本发明的优点在于：依赖于毛细管电泳技术的优势，缩短了筛选时间，仅用4轮循环即可完成；同时减少了由基质作用引起的非特异性筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 特异性 结合 蛋白 核酸 适配体 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种特异性结合甲胎蛋白核酸适配体的筛选方法，其特征在于，所述的筛选方法包括以下步骤：设计并构建大容量随机寡核苷酸文库以及用于PCR扩增的上游引物和下游引物，通过以毛细管电泳为基础的SELEX方法，富集能与甲胎蛋白结合的寡核苷酸，最终经克隆、测序以及验证后得到与甲胎蛋白特异性结合的寡核苷酸，即适配体。
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