[发明专利]一种红火炬郁金的组织培养及根茎膨大方法

摘要

本发明公开了一种红火炬郁金的组织培养及根茎膨大方法，步骤包括1）根茎催芽；2）外植体准备；3）无菌苗培养：培养基为MS；在温度25±2℃、光照强度1500Lx、光照时间12h/d的组培条件下培养7-10d；4）不定芽诱导培养：培养基为MS+6-BA3.0mg/L+TDZ0.2mg/L；温度为25±2℃，光照光强为1500Lx，光照时间12h/d；5)增殖培养和根茎膨大：培养基为：MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.3mg/L，并添加茉莉酸甲酯2.0mg/L：6）生根培养。本发明生根率达100%，增殖和生根周期缩短，使“红火炬”郁金的种苗生产不受时间季节的限制。

主权项

一种红火炬郁金的组织培养及根茎膨大方法，其特征在于步骤如下：1) 根茎催芽：选择将生长健壮饱满的红火炬郁金根茎，用500倍多菌灵浸泡30min，然后放置于塑料穴盘中，覆盖泥炭后浇足水，放入培养箱进行催芽，6‑7d 即能长出0.5~2.0cm 高的小芽；培养条件为：26 ~28℃ 暗培养，每隔一天喷水一次；2）外植体准备：选取步骤1) 生长的小芽，流水冲洗1~2 h，然后于超净工作台上用无菌水冲洗干净，用70%酒精浸泡30‑60 s，再用0.1%升汞溶液或2%次氯酸钠溶液进行灭菌5‑8min，然后用无菌水冲洗多次，备用；3）无菌苗培养：将步骤2) 中备用的小芽接种于无菌苗培养基中，无菌苗培养基为MS ；在温度25±2℃、光照强度1500Lx、光照时间12h/d的组培条件下培养7‑10d，茎尖长至1.0‑2.0cm时成外植体无菌苗；4）不定芽诱导培养：将步骤3) 中的外植体无菌苗接种于不定芽诱导培养基中，不定芽诱导培养基：MS+6‑BA3.0mg/L+ TDZ 0.2 mg/L；培养温度为25±2℃，光照光强为1500Lx，光照时间12h/d下，20‑24d每个外植体均能产生6‑10个1.0‑2.0cm的不定芽；5) 增殖培养和根茎膨大：待步骤 4) 中诱导出不定芽时，将不定芽接种到增殖培养基中，增殖培养基为：MS+ 6‑BA2.0 mg /L+ NAA 0.3mg/L ，并添加生长调节剂茉莉酸甲酯(MeJA)2.0mg /L：培养温度为25±2℃，光照光强为1500Lx，光照时间12h/d下，10‑15d 小苗长到3‑5cm高且基部有明显膨大，直径可达0.8‑1.5cm；6）生根培养：将步骤 5）中的小苗接种到生根培养基中，生根培养基：1/2MS+ NAA0.5mg/L，并添加茉莉酸甲酯(MeJA)2.0 mg /L；培养温度为25±2℃，光照光强为1500Lx，光照时间12h/d下培养12‑15d ，小苗即可长到4‑8cm高且具有至少3条长于2cm的根，生根率达100%，种苗可用于炼苗驯化与移栽；所述的MS以及1/2MS培养基中，添加白糖50～60g/L，琼脂5～8 g/L，调节pH5.6～5.8。