[发明专利]携带人AChE基因的溶瘤病毒载体ZD55及其应用在审

专利信息
申请号: 201410395894.9 申请日: 2014-08-13
公开(公告)号: CN105463020A 公开(公告)日: 2016-04-06
发明(设计)人: 沈正萱;刘新垣;朱依谆 申请(专利权)人: 复旦大学
主分类号: C12N15/86 分类号: C12N15/86;A61K38/46;A61P35/00
代理公司: 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 代理人: 吴桂琴
地址: 200433 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明属于生物医药领域,涉及溶瘤病毒载体ZD55携带并过表达人AChE基因在制备治疗肿瘤制剂中的用途,本发明构建的ZD55-hAChE进体内外试验证实,通过把hAChE基因导入癌细胞内让细胞自身生产AChE(EC 1.1.7)酶蛋白,产生的AChE酶蛋白能提高癌细胞膜内外微环境中的AChE浓度和活性,由此加速降价乙酰胆碱,从而发挥多途径联合抗癌效应。如有效引起癌细胞和癌组织的升高的线粒体膜电位下降,下调关键凋亡因子前体的表达水平,上调裂解的PARP水平,导致核染色体浓缩或破碎;抑制癌细胞克隆和肿瘤干细胞生存能力,癌细胞凋亡,达到治疗癌症的目的。所述的肿瘤选自胃癌,食道癌,结肠癌,肝癌,胰腺癌或子宫颈癌。
搜索关键词: 携带 ache 基因 病毒 载体 zd55 及其 应用
【主权项】:
携带人AChE基因的溶瘤病毒载体ZD551,其特征在于,通过下述方法构建包装,a)用AChE基因正向引物5’‑ATCGAAGCTTATGAGGCCCCCGCAGT‑3’和反向引物5’‑GTACTCTAGATCACAGGTCTGAGCAGC‑3’经PCR扩增;b)PCR所得片段用HindIII和XbaI切割后插入到pCA13窜梭质粒形成pCA13‑AChE;c)在pCA13‑hAChE的CMV‑AChE‑SV40用BglII切割后插入到pZD55窜梭质粒,产生pZD55‑hAChE。
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