[发明专利]一种HPLC波长切换技术同时测定诺尼果汁中多种酚酸含量的方法

摘要

本发明提供一种HPLC波长切换技术同时测定诺尼果汁中多种酚酸含量的方法，该方法包括利用高效液相色谱波长切换技术，对诺尼果汁中的酚酸物质进行定性和定量分析：选用C18色谱柱，流动相为甲醇-冰醋酸水溶液，梯度洗脱，检测器为二极管阵列检测器，通过波长切换完成同时对多种酚酸成分的分离与测定，以标准品峰面积外标法定量。本发明特点在于运用波长切换技术去除干扰物质的影响、同时测定出诺尼果汁中6种酚酸的含量，测定组分在30min内可达到较好分离，准确度高、重现性好。本发明能有效分离、准确测定诺尼果汁中多种酚酸物质，对诺尼果汁功效性成分的研究和产品质量的评价具有重要意义。

主权项

一种HPLC波长切换技术测定诺尼果汁中多种酚酸含量的方法，其特征在于：按照下述步骤同时对诺尼果汁中没食子酸、龙胆酸、P‑羟基苯甲酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸6种酚酸进行定性和定量分析： (1) 混合标准溶液制备分别精确称取标准品没食子酸50mg、龙胆酸100mg、P‑羟基苯甲酸500mg、绿原酸200mg、咖啡酸50mg、阿魏酸30mg，置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，摇匀，为混合标准品储备液，于冰箱4℃避光保存；使用前，根据实验需要将此标准储备液用50%甲醇稀释10‑100倍，配制成系列混合标准溶液, 测定前经0.22μm微孔滤膜过滤；(2) 样品制备取适量诺尼果汁，经有机溶剂多次萃取，合并有机相，浓缩，残渣溶于50 %甲醇中，测定前样品经0.22μm微孔滤膜过滤，用于进样分析；(3) 高效液相色谱分离检测条件采用C18反相色谱柱，以流动相A 冰醋酸溶液；流动相B 甲醇，采用梯度洗脱，二极管阵列检测器波长切换技术测定，检测温度25‑35℃，流速0.8‑1.0 mL/min；(4) 样品定性和定量分析采用系列标准混合溶液按照步骤(1)进行配制，按步骤(3)色谱条件进样；以峰面积y对质量浓度 x绘制标准曲线，得到6种酚酸标准品的回归方程；每个样品按步骤（2）进行前处理后，按步骤(3)色谱条件分别进样分析，样品峰与标准品峰保留时间比对定性，样品峰面积代入相对应的标准曲线回归方程定量。