[发明专利]一种克隆番鸭小鹅瘟病毒基因组编码区全序列的方法在审
| 申请号： | 201410416788.4 | 申请日： | 2014-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN104232672A | 公开（公告）日： | 2014-12-24 |
| 发明（设计）人： | 王劭;陈少莺;程晓霞;林锋强;陈仕龙;王锦祥 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/10;C12R1/93 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 350000 福建省福州市*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种克隆番鸭小鹅瘟病毒基因组编码区全序列的方法，通过从含有番鸭小鹅瘟病毒番鸭胚尿囊液中提取病毒基因组DNA，通过设计的特定引物，以病毒基因组DNA为模板扩增包含编码区全序列的基因片段，将目的基因片段与载体连接，挑取阳性菌落进行测序直接获取番鸭小鹅瘟病毒基因组编码区段全序列。与传统方法相比，本发明的方法具有扩增的目的片段长度长，实验工作量小、成本低、效率高的特点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 克隆 番鸭小鹅 瘟病 基因组 编码 序列 方法 | ||
【主权项】：
一种克隆番鸭小鹅瘟病毒基因组编码区全序列的方法，其特征在于包括下述步骤：1) 从含有MDGPV番鸭胚尿囊液中提取病毒基因组DNA ；2) 以步骤1) 的DNA 作为模板，采用下述引物进行PCR ：上游引物P1：5’‑CACCCGCATGCGCCCGATCTGCC‑3’；下游引物P2：5’‑GCATGCGCCCGATCAGCCTTGACAACCG‑3’；3) 回收和纯化上述PCR产物，获得目的基因片段；4) 将目的基因片段与pcDNA3.1D/V5‑His‑TOPO vector载体连接加入到JM109感受态细胞中进行转化培养，筛选其中的阳性菌落进行培养，以菌液为模板进行PCR 即得MDGPV基因组编码区全序列。
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