[发明专利]一种细胞图案化结构、制备方法及在细胞增殖抑制方面的应用

摘要

一种基于有序聚合物薄膜的细胞图案化结构、制备方法以其在细胞增殖抑制方面的应用，属于细胞的定位组装技术领域。该方法和应用包括内壁负载有正电荷表面活性剂的有序多孔薄膜的制备、与细胞带相反电荷的聚电解质在有序多孔薄膜孔洞内壁的选择性组装、细胞在孔洞内的选择性吸附等步骤。此发明设备简单易得、操作方便、条件温和、周期短、可实现细胞在有序的蜂窝状薄膜孔内的选择性分布，而且通过大小合适的细胞的选择，可制得每个孔洞中只有一个细胞存在的单细胞阵列。此单细胞阵列在生物传感器、组织工程及单细胞携带和行为操作等领域均具有重要的意义。该结构在细胞的转移疏运、增殖抑制、一些癌症及其他疾病的治疗方面具有重要的应用价值。

主权项

一种基于有序聚合物薄膜的细胞图案化结构的制备方法，其步骤如下：1)将聚合物和表面活性剂以20:1～60:1的质量比溶于有机溶剂中，制备聚合物浓度为4～7mg/mL的聚合物有机溶液，将此聚合物有机溶液与去离子水以10:1～50:1的体积比混合，超声10min后得微乳液，用200～220nm的滤头过滤此微乳液，然后在湿度为30～40％、温度为25～30℃的环境中将过滤后的溶液浇铸在清洗过的平滑基底上成膜；待有机溶剂和去离子水完全挥发后，得到孔洞直径为4～6μm，孔洞深度为1～3μm的有序多孔薄膜，表面活性剂分布在制得的有序多孔薄膜的孔洞内壁；2)将步骤1)得到的孔洞内壁分布有表面活性剂的有序多孔薄膜浸入到1～3mg/mL的负电荷聚电解质溶液中，30～50min后，将薄膜取出，再浸入到乙醇与去离子水的混合溶液中润洗5～10min，然后取出薄膜放入40～60℃的干燥箱中干燥30～50min；再将干燥后的薄膜浸入到1～3mg/mL的正电荷聚电解质溶液中，30～50min后将薄膜取出，然后浸入到乙醇与去离子水的混合溶液中润洗5～10min，最后取出薄膜放入40～60℃干燥箱中干燥30～50min，从而得到孔洞内壁负载有正电荷聚电解质的薄膜；3)将4～6mL带有负电荷的细胞的溶液滴在步骤2)得到的孔洞内壁负载有正电荷聚电解质的薄膜上，1～3小时后，将薄膜浸入磷酸缓冲溶液中润洗3～5min，重复在磷酸缓冲溶液中的润洗步骤4～6次，得到孔洞内吸附有细胞的薄膜，从而完成细胞图案化结构的制备。