[发明专利]一种制备高纯度米尔贝肟的方法

摘要

本发明公开了一种制备高纯度米尔贝肟的方法，将米尔贝霉素A3和米尔贝霉素A4从发酵液中提取并初步纯化后，使用氧化活性较低的氧化剂氧化，经硅胶层析将米尔贝霉素A3酮和米尔贝霉素A4酮的含量由不到25％提高到了75％以上，并在浓缩过程中自然析出结晶，使米尔贝霉素A3酮和米尔贝霉素A4酮的含量再次上升到95％以上；然后进行肟化反应，通过树脂层析调整米尔贝霉素A3肟和米尔贝霉素A4肟的含量比例为14，同时能够再次将产品的含量提高到98％以上。整个工艺比较简单，对设备要求较低，通用性好，适用于工业化大生产。

主权项

一种制备高纯度米尔贝肟的方法，包括以下步骤：1)将含有米尔贝霉素A3和米尔贝霉素A4组份的发酵液进行固液分离，然后用第一溶媒萃取菌渣，得到含有米尔贝霉素A3和米尔贝霉素A4组份的提取液；2)将提取液浓缩后上硅胶柱层析，并用第一溶媒和第二溶媒的混合溶液进行洗脱，得到含有米尔贝霉素A3和米尔贝霉素A4组份的解吸液；3)将步骤2)所得解吸液浓缩，去除溶剂，然后用二氯甲烷溶解浓缩物并进行氧化反应，所用氧化剂是活性二氧化锰、氯铬酸吡啶盐或重铬酸吡啶盐，得到含有米尔贝霉素A3酮和米尔贝霉素A4酮的二氯甲烷溶液；4)将步骤3)得到的溶液经活性炭吸附脱色后进行浓缩，浓缩物用第一溶媒溶解，上硅胶柱层析，用第一溶媒和第二溶媒的混合溶液进行洗脱，得到含有米尔贝霉素A3酮和米尔贝霉素A4酮组份的解吸液，然后浓缩结晶，分离出结晶体；5)对结晶体进行肟化反应，加入水终止反应后加入二氯甲烷萃取，得到含有米尔贝霉素A3肟和米尔贝霉素A4肟的二氯甲烷溶液；6)将含有米尔贝霉素A3肟和米尔贝霉素A4肟的二氯甲烷溶液去除溶剂，用第三溶媒的水溶液溶解，进行树脂层析，然后将解吸液按照米尔贝霉素A3肟和米尔贝霉素A4肟含量比例为1:4进行混合，得到解吸混合液；7)用庚烷萃取解吸混合液，得到含有米尔贝霉素A3肟和米尔贝霉素A4肟的庚烷溶液，然后去除溶剂，再用第三溶媒溶解，加水降温进行结晶，固液分离、干燥得到米尔贝肟晶体。