[发明专利]一种猪细小病毒灭活疫苗免疫效力评价方法在审
申请号: | 201410449450.9 | 申请日: | 2014-09-04 |
公开(公告)号: | CN104215781A | 公开(公告)日: | 2014-12-17 |
发明(设计)人: | 吕茂杰;杨保收;盛长忠;梁武 | 申请(专利权)人: | 天津瑞普生物技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/96 | 分类号: | G01N33/96 |
代理公司: | 天津滨海科纬知识产权代理有限公司 12211 | 代理人: | 韩敏 |
地址: | 300308 天津市滨海新区空港经济区*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明提供了一种猪细小病毒灭活疫苗免疫效力评价方法,该方法是通过考察注射疫苗后机体血清抗体水平来评价的,具体技术方法是创新性的建立了针对PPV的ELISA抗体效价评价方法。具有操作简便、特异和敏感等特点,为PPV灭活苗抗体检测提供一种有效技术手段。 | ||
搜索关键词: | 种猪 细小 病毒 疫苗 免疫 效力 评价 方法 | ||
【主权项】:
一种猪细小病毒灭活疫苗免疫效力评价方法,其特征在于包括以下步骤:1)制备标准阴性血清与标准阳性血清:采集PPV HI<1:8的豚鼠血清,经白陶土溶液处理后作为标准阴性血清;选择灭活疫苗免疫阴性豚鼠后血清,经白陶土溶液处理,血凝抑制价>1:64的血清,作为标准阳性血清;2)病毒抗原的浓缩、纯化;3)抗原的包被;4)检测:在酶标板上加入稀释后的待测血清100μl,37℃作用0.5~1.5h;加入已经包被PPV纯化抗原,37℃作用0.5~1.5h;弃去一抗,用PBST洗涤;加入PBS稀释的HRP标记羊抗鼠IgG100μl,37℃作用0.5~1.5h;弃去二抗,用PBST洗涤;加入显色液进行避光显色15~25min;每孔加入50μl终止液终止显色;酶标仪读取OD450的值。
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