[发明专利]一种黄瑞木愈伤组织和悬浮细胞的快速繁殖方法在审
| 申请号： | 201410449790.1 | 申请日： | 2014-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN104170739A | 公开（公告）日： | 2014-12-03 |
| 发明（设计）人： | 张金芳;杨存 | 申请（专利权）人： | 南京标科生物科技有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 无 | 代理人： | 无 |
| 地址： | 210046 江苏省南京市栖*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明研究了一种黄瑞木愈伤组织和悬浮细胞的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞培养等步骤，本发明方法利用细胞悬浮培养方法可以快速获得大量黄瑞木细胞，缩短培养周期，短期内提供大量的制药原料，并能有效降低生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 黄瑞木愈伤 组织 悬浮 细胞 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】：
一种黄瑞木愈伤组织和悬浮细胞的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞培养等，主要步骤如下：（1）取黄瑞木幼嫩茎段和叶片，按照常规的消毒方法对其进行灭菌处理；（2）将步骤（1）消毒处理过的黄瑞木叶片接入培养基配方为MS+2，4‑D 0.5mg/L+IBA3mg/l+4mg/LABA诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，暗室培养；（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入培养基ER+2，4，5‑T0.1‑0.2mg/L+KT0.1‑0.3mg/L+VC100mg/L进行愈伤组织增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L， PH5.8，光照4000lx；（4）取步骤（3）增殖后的愈伤组织放入液体培养基ER+IAA 0.1‑0.2mg/L+6‑BA0.1‑0.3mg/L+椰乳15%进行悬浮细胞培养，附加蔗糖30g/L， PH5.8，光照4000lx。
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