[发明专利]一种快速提取油菜微量DNA的方法无效
| 申请号： | 201410462178.8 | 申请日： | 2014-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN104195133A | 公开（公告）日： | 2014-12-10 |
| 发明（设计）人： | 武语笛;徐超男;杨庆勇;范楚川;周永明 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 张红兵 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于油菜基因组DNA制备技术领域，具体涉及一种快速提取油菜微量DNA的方法。主要步骤包括：向植物器官和/或组织中加入提取缓冲液Buffer，破碎得到植物粉末；于94-100℃水浴培养10min，离心后吸取上清液得到含有DNA的提取液，该提取液稀释后可保存于-20℃下或直接用于PCR反应。与现有的常规CTAB法相比，本发明在PCR扩增方面无明显差异，但具有速度快，操作步骤简单，效率高、无毒害等明显优势。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 提取 油菜 微量 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种快速提取油菜微量DNA的方法，其特征在于如下步骤：(1)采集甘蓝型油菜幼嫩叶片9‑10mg装入2ml离心管，置于冰盒中；(2)加入250ul提取缓冲液Buffer及钢珠，磨样机中研磨3min；(3)置于94‑100℃水浴培养10min，或水浴培养不超过12min，避免影响质量；(4)在12000rpm下，离心5min；(5)吸取上清液，或根据需要，最多吸取50ul上清液，加入超纯水稀释9‑10倍，于‑20℃保存或取2‑3ul直接用于PCR反应；其中：所述提取缓冲液Buffer的配方，由500ml 1M的Tris‑HCl(pH7.5)，17.55g NaCl和102.6g蔗糖加蒸馏水定容至1L后混匀配制而成。
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