[发明专利]基于外切葡聚糖酶的工程菌及其实现方法在审
| 申请号： | 201410462541.6 | 申请日： | 2014-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN104232558A | 公开（公告）日： | 2014-12-24 |
| 发明（设计）人： | 周培;冯海玮;支月娥;孙玉静;罗艳青 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/42;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人： | 王毓理;王锡麟 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种基因工程领域的基于外切葡聚糖酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点和谷胱甘肽标签的引物进行PCR扩增得到编码外切葡聚糖酶的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列连接到表达载体，再将获得的连接产物转入大肠杆菌表达菌株内，获得外切葡聚糖酶过表达重组菌株。本发明通过构建外源表达载体，优化蛋白诱导表达的条件和融合标签等方法，实现了外切葡聚糖酶的胞外过表达。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 外切 聚糖 工程 及其 实现 方法 | ||
【主权项】：
一种外切葡聚糖酶的工程菌，其特征在于，该工程菌为外源表达外切葡聚糖酶的大肠杆菌； 所述的胞内外切葡聚糖酶具体为灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)JSD‐1外切葡聚糖酶基因SG‐CX，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，编码该外切葡聚糖酶核苷酸序列为1737bp，共编码578个氨基酸，其中信号肽切割位于N端第32个氨基酸与第33个氨基酸之间。
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