[发明专利]可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌及其制备方法在审
| 申请号： | 201410462647.6 | 申请日： | 2014-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN105462906A | 公开（公告）日： | 2016-04-06 |
| 发明（设计）人： | 陈声;郭九标;林大川;黄浩贤 | 申请（专利权）人： | 香港理工大学深圳研究院 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/63;C12R1/19 |
| 代理公司： | 深圳中一专利商标事务所 44237 | 代理人： | 张全文 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市南山区高新技术*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌制备方法，包括：PCR扩增EGFP基因；将PCR扩增获得的EGFP基因与环状质粒载体重组，得到重组质粒；获取待定植动物肠道的大肠杆菌，并进行感受态处理后形成感受态肠道大肠杆菌；将重组质粒导入至感受态肠道大肠杆菌，形成可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌。采用本发明的可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌，工程菌构建过程中采用原始动物肠道的大肠杆菌作为宿主，并采用pCR2.1c-TOPO或pTrcHis B作为载体便于筛选，以及在逆境环境下其本身具有良好的抗性使其更具优良的存活性，相比其他肠道大肠杆菌具备更强的竞争性，并利于长久监测掌握动物肠道菌在逆境下的动态变异规律；而且还可以根据跟踪需求控制其表达。 | ||
| 搜索关键词： | 定植 动物 肠道 荧光 标记 大肠杆菌 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌制备方法，包括如下步骤：PCR扩增EGFP基因；将所述PCR扩增获得的EGFP基因与环状质粒载体重组，得到重组质粒；其中，所述环状质粒载体为pCR2.1c‑TOPO或pTrcHis B获取待定植动物肠道的大肠杆菌，并进行感受态处理后形成感受态肠道大肠杆菌；将重组质粒导入至感受态肠道大肠杆菌，形成转化工程菌，即为可定植动物肠道的荧光标记大肠杆菌。
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