[发明专利]一种苦石莲悬浮细胞培养的快速繁殖方法在审
申请号: | 201410463128.1 | 申请日: | 2014-09-12 |
公开(公告)号: | CN104255467A | 公开(公告)日: | 2015-01-07 |
发明(设计)人: | 杨存 | 申请(专利权)人: | 南京通泽农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 210046 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明研究了一种苦石莲悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的培养及条件的优化等步骤,本发明方法所制备的苦石莲悬浮细胞增殖系数高,生长周期短,次生代谢物含量高,为苦石莲药用成分的开发和利用提供新的途径。 | ||
搜索关键词: | 一种 苦石莲 悬浮 细胞培养 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】:
一种苦石莲悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的培养及条件的优化,其主要步骤如下:(1)取苦石莲幼嫩的叶片,在超净工作台上对其进行消毒处理;(2)取步骤(1)消毒处理过的叶片接入ER+NAA0.05mg/L+6‑BA5.0mg/L+IBA0.25mg/L+2,4‑D1.0mg/L培养基中进行愈伤组织诱导,附加7g/L琼脂,30g/L葡萄糖,1000lx,温度23℃,湿度50%;(3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织,接入ER+NAA2.0mg/L+6‑BA3.0mg/L +2,4‑D3.0mg/L+NAA2.0mg/L+巯基乙醇3‑5ml/L培养基中进行愈伤组织增殖,附加7g/L琼脂,30g/L葡萄糖,2000lx,温度23℃,湿度50%;(4)取步骤(3)生长良好,长势均一的愈伤组织,称取0.3g加入ER+2,4‑D3.0mg/L+KT0.1mg/L+对氨基苯甲酸80‑100mg/L+0.35%琼脂+20g/L葡萄糖培养基中震荡培养,培养一定时间后,取出样品,用滤纸吸干细胞表面水分。
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