[发明专利]一种云南栘依悬浮细胞培养的快速繁殖方法在审
| 申请号： | 201410463173.7 | 申请日： | 2014-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN104206276A | 公开（公告）日： | 2014-12-17 |
| 发明（设计）人： | 杨存 | 申请（专利权）人： | 南京通泽农业科技有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210046 江苏省南京市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明研究了一种云南栘依悬浮细胞培养的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞的培养等步骤，本发明方法所制备的云南栘依悬浮细胞克服了生境的局限，生长分裂速度快，操作可控，有助于获得大量的药用代谢产物。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 云南 悬浮 细胞培养 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】：
一种云南栘依悬浮细胞培养的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞的培养，其主要步骤如下：（1）采取云南栘依幼嫩的叶片，在超净工作台上对其进行消毒处理；（2）取步骤（1）消毒处理过的叶片接种入B5+KT0.3‑0.5mg/L+6‑BA0.5‑1.0mg/L+IBA0.2‑0.25mg/L+3%蔗糖+0.65%琼脂培养基中进行愈伤组织诱导，光照强度800lx，光期7h，暗期17h；（3）取步骤（2）中诱导出来的嫩绿松散的云南栘依愈伤组织接入B5+1.5mg/L2，4‑D+1mol/L蛋白胨+100mg/L水解酪蛋白+1mol/L蔗糖进行悬浮细胞的培养，pH5.6，光照3000lx，温度25℃；按照权利要求1所述的一种云南栘依悬浮细胞培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述云南栘依无菌叶片的获得为，取云南栘依幼嫩的叶片，在漂白粉中浸泡2min，毛刷去除表面被毛和污垢，流水冲洗10min，超净工作台上0.1%氯化汞溶液消毒11min，同时均匀摇动，无菌水冲洗6‑7遍，吸水纸吸去表面水分。
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