[发明专利]基于单链DNA分子构建测序文库的方法及其应用有效
| 申请号： | 201410466261.2 | 申请日： | 2014-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN105463585B | 公开（公告）日： | 2018-04-20 |
| 发明（设计）人： | 颉伟;尹强宗;吴婧怡;徐丰;彭旭 | 申请（专利权）人： | 清华大学;新加坡科技研究局临床科学研究院 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C40B40/06;C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙)11201 | 代理人： | 李志东 |
| 地址： | 100084 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了基于单链DNA分子构建测序文库的方法及其应用，其中，测序文库构建方法包括(1)在单链DNA分子的3’末端形成poly(C)n尾部，其中，n代表碱基C的数目；(2)利用延伸引物，基于所述具有Poly(C)n尾部的单链DNA分子，获得双链DNA分子，其中，延伸引物在其3’末端包括H(G)m单元，H为碱基A、碱基T或碱基C，m为碱基G的数目；以及(3)在所述双链DNA分子远离H(G)m单元的一端连接接头，并对所得到的连接产物进行扩增，所述扩增产物构成所述测序文库。该方法能够有效地构建单链DNA分子的测序文库，特别是微量样本的测序文库。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 dna 分子 构建 序文 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种基于单链DNA分子构建测序文库的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在单链DNA分子的3’末端形成poly(C)n尾部，以便获得具有Poly(C)n尾部的单链DNA分子，其中，n代表碱基C的数目，并且n为5～30之间的整数；(2)利用延伸引物，基于所述具有Poly(C)n尾部的单链DNA分子，获得双链DNA分子，其中，延伸引物在其3’末端包括H(G)m单元，H为碱基A、碱基T或碱基C，m为碱基G的数目，并且m为5～15之间的整数；以及(3)在所述双链DNA分子远离H(G)m单元的一端连接接头，并对所得到的连接产物进行扩增，以便获得扩增产物，所述扩增产物构成所述测序文库。
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