[发明专利]一种铁皮石斛试管内开花的方法

摘要

本发明提供一种铁皮石斛离体开花的方法，包括如下步骤：增殖培养、生根培养、开花培养和常规培养直至开花。本发明的方法外植体消毒效率高达90%，增值倍数达到4，无菌苗生根率达100%；正常花诱导率最高达84%，最低为25%，每株开l～3朵花不等。铁皮石斛试管离体开花技术极大地解决了铁皮石斛自然及栽培条件下开花周期较长以及病虫害感染等诸多问题，能快速提供铁皮石斛种苗、缩短育种年限以适应市场的需求。

主权项

1.一种铁皮石斛试管内开花的方法，包括如下步骤：1)增殖培养：选取长势旺盛、叶片翠绿及长势一致的铁皮石斛无菌苗，接种于增殖培养基中，常规培养至分化出丛生芽，获得大量的铁皮石斛无菌苗；2)生根培养：挑选步骤1)长势旺盛、叶片翠绿及长势一致的铁皮石斛无菌苗，接种于生根培养基中，常规培养至长出白色的根；3)开花培养：挑选步骤2)中根长0.5‑1cm的铁皮石斛苗，接种至花芽诱导培养基上，常规培养，直至开花；所述铁皮石斛增殖培养基为以MS固体培养基为基本培养基，所含蔗糖浓度为30g/L、萘乙酸浓度为0.1mg/L、6‑苄氨基嘌呤浓度为3.0mg/L的培养基；所述铁皮石斛生根培养基为以1/2MS固体培养基为基本培养基，所含蔗糖浓度为30g/L、萘乙酸浓度为0.05mg/L、活性炭浓度为1mg/L的培养基；所述铁皮石斛花芽诱导培养基为以MS固体培养基为基本培养基，所含蔗糖浓度为30g/L、萘乙酸浓度为0.1mg/L、6‑苄氨基嘌呤浓度为3.5mg/L的培养基；所述常规培养的培养条件为pH值5.8，培养温度26℃，光照周期12小时/天，光照强度为1000lx。