[发明专利]利用RT-PCR法进行家蚕相对强健品种选择的方法有效

专利信息
申请号: 201410469260.3 申请日: 2014-09-15
公开(公告)号: CN104293918A 公开(公告)日: 2015-01-21
发明(设计)人: 屠振力 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 杭州中成专利事务所有限公司 33212 代理人: 金祺
地址: 310058 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了一种利用RT-PCR法进行家蚕相对强健品种选择的方法:选用饲养至5龄第2天的家蚕,对每种家蚕均依次进行如下步骤1)~5):1)将家蚕进行高温冲击处理;2)将高温冲击处理家蚕以及饲养至5龄第2天的家蚕分别处死后进行解剖提取脂肪体;3)对脂肪体进行RNA抽提;4)以提取的RNA为模板进行反转录;5)利用所得的cDNA进行热激蛋白基因的荧光定量PCR检测,得热激蛋白基因表达量;5龄第2天家蚕的基因荧光表达量为X1,高温冲击后家蚕的基因荧光表达量为X2,X1+2(X2-X1)=Y;6)将不同品种的家蚕所对应的Y进行比对,Y值大的所对应的家蚕为家蚕相对性强健品种。
搜索关键词: 利用 rt pcr 进行 家蚕 相对 强健 品种 选择 方法
【主权项】:
利用RT‑PCR法进行家蚕相对强健品种选择的方法,其特征是:选用饲养至5龄第2天的家蚕,以至少2种的家蚕作为待测对象,对每种家蚕均依次进行如下步骤1)~5):1)、将家蚕进行高温冲击处理;所述高温冲击处理为:将饲养至5龄第2天的家蚕于34.5~35.5℃放置3.5~4.5小时;2)、将高温冲击处理家蚕以及饲养至5龄第2天的家蚕分别处死后进行解剖提取脂肪体;3)、对步骤2)所得的脂肪体进行RNA抽提;4)、以提取的RNA为模板进行反转录,得cDNA;5)、利用所得的cDNA进行热激蛋白基因的荧光定量PCR检测,得热激蛋白基因表达量;5龄第2天家蚕的基因荧光表达量为X1,高温冲击后家蚕的基因荧光表达量为X2,X1+2(X2-X1)=Y;6)、将不同品种的家蚕所对应的Y进行比对,Y值大的所对应的家蚕为家蚕相对性强健品种。
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